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哺乳動物瞬時表達廣泛地應(yīng)用于基因產(chǎn)物的快速表達及蛋白質(zhì)的小規(guī)模制備等方面,。細胞瞬時轉(zhuǎn)染表達能夠快速靈活的制備重組蛋白,,細胞在轉(zhuǎn)染后合適時機即能可收獲并進行分析.在瞬時轉(zhuǎn)染中,,重組DNA導(dǎo)入感染性強的細胞系以獲得目的基因暫時高水平的表達。轉(zhuǎn)染的DNA不必整合進宿主染色體,,當有大量樣品需要在短時間內(nèi)分析時,,尤其是在轉(zhuǎn)染后1到4天內(nèi)收獲細胞,所得溶解產(chǎn)物用于檢測目的基因的表達時,,可以采用瞬時轉(zhuǎn)染的方式,。
哺乳動物瞬時表達適用于生成具有天然結(jié)構(gòu)和活性的哺乳動物蛋白的選用表達平臺,,可以實現(xiàn)高水平的翻譯后加工,,使蛋白質(zhì)獲得最佳功能活性,適合在最類似生理學(xué)的環(huán)境中研究特定蛋白質(zhì)的功能,。它常用于抗體和治療性蛋白質(zhì)以及人類功能細胞分析的蛋白質(zhì)表達,。結(jié)構(gòu)和性質(zhì)更穩(wěn)定:基于CHO和HEK293細胞的高密度表達。雙重驗證:常規(guī)和高密度瞬時表達組合鑒定,。適用于高難度和低表達水平蛋白,。表達水平提高:產(chǎn)量提高可達 100倍,重組抗體可高達 3g/L,。生產(chǎn)周期快:從序列到蛋白/抗體僅需10周,。
哺乳動物瞬時表達受體細胞應(yīng)具備的條件:
遺傳穩(wěn)定性:外源基因多次傳代后不至于丟失,易于長期保存,。
細胞系特征:喪失細胞接觸抑制和錨地依賴特征,,便于大規(guī)模培養(yǎng)。
安全性能好:不合成分泌致病物質(zhì),,不致癌,。
合適的標記:便于轉(zhuǎn)化株的篩選和維持。
生長快且齊:分裂周期短,,生長均一,,便于控制。