詳細(xì)介紹
組織來(lái)源:骨髓
產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔肺成纖維細(xì)胞分離自骨髓,;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞,。血小板有止血作用,,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌,、病毒等,;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,,骨髓不但是造血器官,,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(zhǎng)骨(如肱骨,、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,,稱(chēng)為紅骨髓,。出生時(shí),紅骨髓充滿(mǎn)全身骨髓腔,,隨著年齡增大,,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。骨髓基質(zhì)系統(tǒng)內(nèi)存在的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一種除造血干細(xì)胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細(xì)胞,,可以向骨,、軟骨、肌組織,、皮膚,、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化,,因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞,。在骨髓中,BMSC占骨髓有核細(xì)胞總數(shù)的0.001%-0.1%,,含量極低,。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)條件要求較高,,在培養(yǎng)過(guò)程中,受貼壁時(shí)間,、種植密度,、血清含量,、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響,。
本公司生產(chǎn)的兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心,、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶;細(xì)胞經(jīng)CD90/CD44,、CD34/CD45免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息:
DMEM-F12,、FBS,、間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、Glutamine,、Penicillin,、Streptomycin等
我們推薦使用Procell兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號(hào):CM-Rb007)作為體外培養(yǎng)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)基。
收到兔肺成纖維細(xì)胞后,,檢查外包裝是否完整,,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問(wèn)題,,請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系,。并進(jìn)行以下操作:
1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3. 預(yù)熱*培養(yǎng)基(含1%雙抗)。
4. 顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張),。
5. ①若細(xì)胞密度較小,無(wú)菌操作,,去掉培養(yǎng)基,。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基,。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,,進(jìn)行傳代,。
②若細(xì)胞密度較大,達(dá)到80%以上,,將細(xì)胞傳代培養(yǎng),。
注:
培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%,建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基,。由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題,,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái),顯微鏡下觀(guān)察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,,這時(shí)請(qǐng)?jiān)谂恼蘸髮腋〉募?xì)胞即時(shí)離心,,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,。(這里是針對(duì)原來(lái)*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,,如果原來(lái)FBS濃度是20%,可以增加到25%FBS濃度) 收到細(xì)胞后如細(xì)胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問(wèn)題,,請(qǐng)當(dāng)天反饋并提供圖片,,且保存前三天照片以便分析。7天內(nèi)反饋,,細(xì)胞本身問(wèn)題免費(fèi)重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實(shí)際情況酌情處理,;7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格,不予免費(fèi)售后,。