日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

產(chǎn)品展廳收藏該商鋪

您好 登錄 注冊(cè)

當(dāng)前位置:
上海雅吉生物科技有限公司>技術(shù)文章>貓杯狀病毒探針法熒光定量 RT-PCR 試劑盒說明書

技術(shù)文章

貓杯狀病毒探針法熒光定量 RT-PCR 試劑盒說明書

閱讀:901          發(fā)布時(shí)間:2021-6-30

貓杯狀病毒(Feline Calicivirus,,FCV)是一種 RNA 病毒,,會(huì)引起貓杯狀病毒感染,是一種貓病毒性呼吸道傳染病,,主要表現(xiàn)為上呼吸道癥狀,,即精神沉郁漿液性和粘液性鼻漏、結(jié)膜炎,、口腔炎,、氣管炎、支氣管炎,,伴有雙相熱,。貓杯狀病毒感染是貓的多發(fā)病,發(fā)病率高,,死亡率低,,因此貓杯狀病毒的快速準(zhǔn)確鑒定對(duì)該病的預(yù)防和檢疫有著重要作用。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測(cè)貓杯狀病毒的試劑盒,,它具有下列特點(diǎn):

1. 即開即用,,用戶只需要提供樣品 RNA 模板。

2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,,靈敏性高,。

3. 提供陽性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品,。

4. 特異性高,,引物是根據(jù)貓杯狀病毒高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的 RNA

發(fā)生交叉反應(yīng),。

5. 本產(chǎn)品足夠 50  20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng),。

本產(chǎn)品只能用于科研。

 

成分

編號(hào)

十孔盒包裝

探針法 qRT-PCR 緩沖液

190504a

500μL藍(lán)蓋

探針法 qRT-PCR 酶混合液

190504b

100μL(紅蓋)

熒光PCR 專用模板稀釋液

180701

1 mL(黃蓋

貓杯狀病毒探針法 qRT-PCR 引物混合液

15-79500yw

100 μL(白蓋)

貓杯狀病毒 qRT-PCR 探針

15-79500pb

50 μL(棕色管

貓杯狀病毒探針法 qRT-PCR 陽性對(duì)照(1×10E8 拷貝/μL)

60908-79500pc

50 μL黃蓋

使用手冊(cè)

15-79500sc

1 份

 

 

一,、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品 10E2-10E7 拷貝/μL  6 個(gè) 10 倍稀釋度為例),。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能

污染他成,。產(chǎn)穩(wěn)定性擴(kuò)病原,, 本產(chǎn)陽性對(duì)染性 DNA 性對(duì)照1. 標(biāo)記 6 個(gè),, 7,,6,5,,4,,3,2,。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 專用模板稀釋液,,最好用帶芯槍頭,下同,。

 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(試劑盒提供),,充分震

蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用,。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用,。
5. 換槍頭,,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用,。二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有 N 個(gè)樣品,,最好設(shè)置 N+2 個(gè)提取,,多出的一個(gè)是 PC(樣品制備陽性
對(duì)照),一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對(duì)照),??梢杂?10μL 陽性對(duì)照的 10000 倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC,。另外用水作為 NC。
8. 用自選方法純化樣品的 RNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒 RNA 提取試劑盒兼容,。也可以選購本公司的柱式病毒 RNAout,。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),,則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),,6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,,并且只做 1 次重復(fù),,則標(biāo)記 N+4 個(gè)PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),,1 個(gè)用于 PCR 陽性對(duì)照(用第 4 號(hào)管的陽性對(duì)照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟,。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù),。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后最后加):

  • 如果把本試劑盒用于定量檢測(cè),,則以陽性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,,以 Ct 為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,。再以待測(cè)樣品的 Ct 值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出樣品 RNA 濃度的 log 值,,再推算出其濃度。
  • 如果把本試劑盒用于定性檢測(cè),,只判斷陽性或陰性,,則陰性對(duì)照 Ct 必須大于或等于 40。陽性對(duì)照必須有熒光對(duì)數(shù)增長(zhǎng),,有典型擴(kuò)增曲線,,Ct 值應(yīng)該小于或等于 30。對(duì)待測(cè)樣品,,如果其 Ct 大于或等于 40 則為陰性,,如果小于或等于 35 則為陽性。如果在 35-40 之間,,則重復(fù)一次,。重復(fù)實(shí)驗(yàn)的 Ct 值如果大于或等于 40 則為陰性,如果小于 35,,則為陽性,。

 

收藏該商鋪

請(qǐng) 登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~

對(duì)比框

產(chǎn)品對(duì)比 產(chǎn)品對(duì)比 聯(lián)系電話 二維碼 在線交流

掃一掃訪問手機(jī)商鋪
021-34661276
在線留言