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為了更好的幫助客戶提供真實的原代細胞,，使用免疫熒光鑒定出提取的細胞類型，免疫熒光技術又稱熒光抗體技術，是標記免疫技術中發(fā)展最早的一種,。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術,。該技術的主要特點是：特異性強,、敏感性高、速度快,。 一下是賽百慷技術人員提供的免疫熒光細胞鑒定的步驟,，僅做參考：

 

1.細胞爬片

取4片玻璃片于24孔板中，每孔加入培養(yǎng)基1mL,，加入細胞0.02million個/孔,。置培養(yǎng)箱2h或過夜。
2.固定
細胞爬片后,，吸出培養(yǎng)基,，用PBS洗一遍，加入4% PFA于4℃固定30min,。用PBS洗3×5min/次,。也可最后一次不吸出PBS，放4℃過夜,。
3.破膜封閉
將玻片除去水分,，置于培養(yǎng)皿支撐物上,，
玻璃片封閉液配置：0.5% Trition X-100與PBS 1:1混合，再加10% 血清,，
取50uL破膜封閉液滴于防水膜上,，將玻片上有細胞的一面蓋上2h。
4.一抗孵育
一抗配置：抗體與PBS 1:100（200）稀釋
破膜后,，取50uL一抗于防水膜上（濕盒中）,，將玻片有細胞的一面蓋上置于4℃（最多可放置一周）
陰性對照組可用PBS代替一抗。
5.二抗孵育
PBS洗3×5min/次,，
二抗混合液配置：二抗：PBS=1:500
DAPI:PBS=1:1000
防水膜上滴50uL二抗混合液,，蓋上玻片，避光,，室溫放置2h,。
6.包埋

PBS洗3×5min/次，玻片上各滴1滴Fluoromount-G,，將有細胞的一面蓋上,。