詳細(xì)介紹
白鰱尾鰭細(xì)胞系從表觀正常的成年雌性可卡犬中建立了細(xì)胞株MDCK (ATCC CCL-34),從中克隆建立了狗上皮樣細(xì)胞株Super Tube。 當(dāng)維持高細(xì)胞濃度時,,Super tube形成大量的小管(據(jù)報道,,24孔板的每孔鋪7x105細(xì)胞,3天內(nèi)就能形成小管),。 要形成小管,,細(xì)胞需要每天兩次換液以提供足夠養(yǎng)分。 與原始細(xì)胞株相比,,Super Tube的c-AMP的檢測水平低得多,,在forskolin刺激下讀出的腺苷環(huán)化酶水平也低;它的跨上皮抗性也比Super Dome (ATCC CRL- 2286) 和 MDCK都低,。
規(guī)格:5×105cells/瓶
培養(yǎng)條件:37℃,,5% CO2,PH值7.2~7.4,,無菌恒溫培養(yǎng),。
細(xì)胞數(shù)量:1× 106個
細(xì)胞傳代:1:4~1:6傳代;每周換液2~3次
細(xì)胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細(xì)胞檢測:細(xì)胞不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌
培養(yǎng)條件:DMEM(高糖) +10% FBS,;37℃,,5% CO2
傳代方法:建議1:2-1:3 兩天換液一次
凍存條件:90%FBS+10%DMSO
細(xì)胞凍存:液氮凍存?????
T25瓶細(xì)胞處理方法
收到白鰱尾鰭細(xì)胞系后,檢查外包裝是否完整,,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,。如有破損漏液等問題,請即時聯(lián)系,。并進(jìn)行以下操作:
1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部,。
2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3. 預(yù)熱*培養(yǎng)基(含1%雙抗),。
4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張),。
5. ①若細(xì)胞密度較小,,無菌操作,去掉培養(yǎng)基,。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基,。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,進(jìn)行傳代,。
②若細(xì)胞密度較大,,達(dá)到80%以上,將細(xì)胞傳代培養(yǎng),。
注:
培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%,,建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基。由于運輸過程中的問題,,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,這時請在拍照后將懸浮的細(xì)胞即時離心,,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天,;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基。(這里是針對原來*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,,如果原來FBS濃度是20%,,可以增加到25%FBS濃度) 收到細(xì)胞后如細(xì)胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問題,請當(dāng)天反饋并提供圖片,,且保存前三天照片以便分析,。7天內(nèi)反饋,細(xì)胞本身問題免費重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實際情況酌情處理,;7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格,,不予免費售后。