詳細介紹
CT26.WT小鼠結(jié)腸癌細胞系背景資料:CT26 是以N-nitroso-N-methylurethane-(NNMU)誘導(dǎo)形成的未分化結(jié)腸癌細胞株,。 它克隆形成的細胞株命名為CT26.WT (ATCC CRL-2638),。 用包含編碼典型腫瘤相關(guān)抗原(TAA) beta-半乳糖苷酶(beta-gal)的lacZ基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體LXSN穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CT26.WT,得到致死的亞克隆CT26.CL25 (ATCC CRL-2639),。 即使CT26.CL25表達了典型的TAA beta-半乳糖苷酶,,在正常小鼠中CT26.CL25 和 CT26.WT的生長率與致死率也保持基本*。 與CT26.CL25 (ATCC CRL-2639)一起可用作測試免疫治療程序的模型,,并用于研究宿主免疫反應(yīng),。 2001年七月提交到ATCC的培養(yǎng)物污染了支原體。 其后代通過BM 細胞周期蛋白處理21天消除支原體。 處理后六周,,用Hoechst染色,、PCR和標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)測試進行支原體檢測。 結(jié)果都呈陰性,。
規(guī)格:5×105cells/瓶
培養(yǎng)條件:37℃,,5% CO2,PH值7.2~7.4,,無菌恒溫培養(yǎng),。
細胞數(shù)量:1× 106個
細胞傳代:1:4~1:6傳代;每周換液2~3次
細胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細胞檢測:細胞不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌
培養(yǎng)條件:DMEM(高糖) +10% FBS;37℃,,5% CO2
傳代方法:建議1:2-1:3 兩天換液一次
凍存條件:90%FBS+10%DMSO
細胞凍存:液氮凍存?????
T25瓶細胞處理方法
收到CT26.WT小鼠結(jié)腸癌細胞系后,,檢查外包裝是否完整,細胞培養(yǎng)瓶是否完好,。如有破損漏液等問題,,請即時聯(lián)系。并進行以下操作:
1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部,。
2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理,以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
3. 預(yù)熱*培養(yǎng)基(含1%雙抗),。
4. 顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張),。
5. ①若細胞密度較小,,無菌操作,去掉培養(yǎng)基,。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基,。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上,,進行傳代,。
②若細胞密度較大,達到80%以上,,將細胞傳代培養(yǎng),。
注:
培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%,建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基。由于運輸過程中的問題,,細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,這時請在拍照后將懸浮的細胞即時離心,,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天,;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基。(這里是針對原來*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,,如果原來FBS濃度是20%,,可以增加到25%FBS濃度) 收到細胞后如細胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問題,請當(dāng)天反饋并提供圖片,,且保存前三天照片以便分析,。7天內(nèi)反饋,細胞本身問題免費重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實際情況酌情處理,;7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格,,不予免費售后。
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