小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法,、差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為T25瓶,；細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

1.產(chǎn)品名稱：小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞
2.組織來源：皮膚組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介：
小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞分離自皮膚組織,；表皮位于動(dòng)物皮膚的外層，由胚胎時(shí)期外胚層形成,，具有抗摩擦和抗損傷的作用,。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成,。從基底層到表面可分為五層,，即基底層、棘層,、顆粒層,、透明層和角質(zhì)層。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞是一種能合成角質(zhì)蛋白的上皮細(xì)胞,，此類細(xì)胞為表皮的主體,，由表皮深層始逐漸增殖、分化,，并在成為角化的角質(zhì)細(xì)胞中,，細(xì)胞核與細(xì)胞器*消失,，細(xì)胞亦失去生理功能而脫落。未脫落部分對機(jī)體尚有保護(hù)作用,，故不必在洗擦身體時(shí)用力搓擦,，使其過早脫失。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞主要分布于表皮基底層,，在上皮程序性死亡后,，細(xì)胞產(chǎn)生角化并移向表皮。體外培養(yǎng)的表皮角化細(xì)胞容易導(dǎo)致終末分化,，不能充分增殖。角質(zhì)形成細(xì)胞終產(chǎn)生角質(zhì)蛋白,，在其向角質(zhì)細(xì)胞演變過程中,，一般可以分為四層，即基底層,、棘層,、顆粒層以及角質(zhì)層。有人把前三層或前二層稱為生發(fā)層或馬爾匹基層,。此外,，在某些部位，特別在掌跖部位,，角質(zhì)層下方還可見到透明層,。
本公司生產(chǎn)的小鼠表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-膠原酶混合消化法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶,；細(xì)胞純度可達(dá)80%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息：
F12,、bFGF,、Insulin、Transferrin,、Heparin,、Hydrocortisone、Penicillin,、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號(hào)：CM-M094）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。

三,、使用方法
在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞可傳3-5代,；建議您收到
細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn),。
客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作,。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽
和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次,；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培
養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白酶消化液,，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察,，待
細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
四,、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，胰酶消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和
技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時(shí)
和我們，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問
題得到解決。
5. 只可用于科研,。

備注：由于實(shí)驗(yàn)所用試劑,、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考