小鼠成骨細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法,、差速貼壁法,，并通過上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為T25瓶；細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

1.產(chǎn)品名稱：小鼠成骨細(xì)胞
2.組織來源：顱骨組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介：
小鼠成骨細(xì)胞分離自顱骨組織；顱骨位于脊柱上方,，由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成,。除下頜骨及舌骨外，其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié),，起著保護(hù)和支持腦,、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分,。腦顱位于顱的后上部,，內(nèi)有顱腔，容納腦,，共8塊,。面顱為顱的前下部分，包含眶,、鼻腔,、口腔等結(jié)構(gòu)，構(gòu)成面部的支架,，共15塊,。成骨細(xì)胞是骨形成的主要功能細(xì)胞，負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成,、分泌和礦化,。骨不斷地進(jìn)行著重建，骨重建過程包括破骨細(xì)胞貼附在舊骨區(qū)域,，分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì),，分泌蛋白酶消化骨基質(zhì)，形成骨吸收陷窩,；其后,，成骨細(xì)胞移行至被吸收部位，分泌骨基質(zhì),，骨基質(zhì)礦化而形成新骨,；破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵,。成骨細(xì)胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機(jī)制、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ),，也是藥物篩選,、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段。
本公司生產(chǎn)的采用先用胰蛋白酶短時(shí)間消化,、后用膠原酶反復(fù)消化制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)堿性磷酸酶染色和茜素紅染色鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
5.培養(yǎng)基信息：
DMEM[H]、FBS,、Glutamine,、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：CM-M091）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。

三、使用方法
在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,，小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞可傳3-5代,；建議您收到
細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后,，請按照以下方法進(jìn)行操作,。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜,，放入37℃、5%CO2,、飽
和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培
養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白酶消化液,，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察,，待
細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
四,、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，胰酶消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和
技術(shù)部溝通,；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時(shí)
和我們,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問
題得到解決,。
5. 只可用于科研,。

備注：由于實(shí)驗(yàn)所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,，以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考