小鼠滑膜細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法,、差速貼壁法,，并通過上皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為T25瓶,；細胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

1.產(chǎn)品名稱：小鼠滑膜細胞
2.組織來源：滑膜組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：
小鼠滑膜細胞分離自滑膜組織,；滑膜組織是位于關(guān)節(jié)腔內(nèi)面的內(nèi)襯結(jié)構(gòu),，各種關(guān)節(jié)內(nèi)疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu),，同時在各種關(guān)節(jié)疾患中也是主要病變部位,。骨關(guān)節(jié)炎（OA）以關(guān)節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣鳎洳±砀淖兝奂瓣P(guān)節(jié)的各個組成部分,，但絕不僅局限于軟骨,，還包括軟骨下骨、滑膜,、半月板和韌帶,。各組成部分的病理改變相互影響,，相互作用，共同加速關(guān)節(jié)的退變,?；ぜ毎菢?gòu)成滑膜層的大細胞群體，是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu),，它包埋在顆粒狀無定性的基質(zhì)中,，基質(zhì)內(nèi)有分散的纖維分布?；び葾型（巨噬樣滑膜細胞）,、B型（成纖維樣滑膜細胞）以及C型（樹突細胞樣滑膜細胞）細胞組成?；ぜ毎饕δ埽孩倩ぜ毎a(chǎn)生潤滑液成分,，并且與關(guān)節(jié)腔的吸收和血液/潤滑液交換有關(guān)；②滑膜細胞增生,，表現(xiàn)為不依賴于支持物生長,，并且分泌大量的效應(yīng)分子來促進炎癥和關(guān)節(jié)損壞；③是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡(luò)中效應(yīng)因子的一部分,。
本公司生產(chǎn)的采用混合酶消化法制備而來,，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
5.培養(yǎng)基信息：
DMEM[H]、FBS,、成纖維細胞生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：CM-M083）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。

三,、使用方法
在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,，小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞可傳3-5代,；建議您收到
細胞后盡快進行相關(guān)實驗。
客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽
和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 待細胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次,；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培
養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白酶消化液,，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察,，待
細胞回縮變圓后,，再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4) 待細胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
四,、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和
技術(shù)部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時
和我們，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問
題得到解決。
5. 只可用于科研,。

備注：由于實驗所用試劑,、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實驗室參考