小鼠腎小球系膜細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法,、差速貼壁法，并通過上皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為T25瓶,；細胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

1.產(chǎn)品名稱：小鼠腎小球系膜細胞
2.組織來源：腎組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：
小鼠腎小球系膜細胞分離自腎小球組織,；腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢，被鮑氏囊所包裹,，是尿液形成的重要構(gòu)造,。血液經(jīng)由入球小動脈進入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管,，匯流入靜脈,，而是流入出球小動脈,。在腎小球內(nèi)，微血管受到高壓,，而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進行,。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后，形成濾液,，滲入鮑氏囊內(nèi),。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率,。腎小球系膜是位于腎小球毛細血管袢之間的一種特殊間充質(zhì),，由系膜細胞和系膜基質(zhì)組成。腎小球系膜細胞是腎小球內(nèi)非?；钴S的細胞,，具有分泌細胞基質(zhì)、產(chǎn)生細胞因子,、吞噬和清除大分子物質(zhì)及類似平滑肌細胞收縮的功能,。腎小球系膜細胞增生和基質(zhì)的過多產(chǎn)生是多種腎小球腎炎的主要病理表現(xiàn)。腎小球系膜細胞的培養(yǎng)是研究系膜擴張,、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法,。系膜細胞的主要作用可能有：①收縮作用，入球小動脈和出球動脈的收縮作用受系膜細胞的調(diào)節(jié),，以影響毛細血管袢的內(nèi)壓和濾過率,；②支持作用，它填充于毛細血管袢之間,，支持毛細血管的位置,；③吞噬作用，能吞噬被阻留在基膜內(nèi)的大分子物質(zhì)和蛋白質(zhì),；④分泌腎素,，在腎缺血或免疫復(fù)合物沉積時，系膜細胞增生且分泌腎素,。
本公司生產(chǎn)的采用機械研磨法結(jié)合不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩過濾后使用膠原酶消化制備而來,，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
5.培養(yǎng)基信息：
DMEM[H],、FBS,、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：CM-M057）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。

三,、使用方法
在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞可傳3-5代,；建議您收到
細胞后盡快進行相關(guān)實驗,。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作,。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽
和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 待細胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次,；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培
養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白酶消化液,，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察,，待
細胞回縮變圓后，再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化,；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；
4) 待細胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
四,、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和
技術(shù)部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時
和我們,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問
題得到解決,。
5. 只可用于科研,。
備注：由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,，以上方法僅供各實驗室參考