詳細介紹
1.產品名稱:小鼠卵巢成纖維細胞
2.組織來源:卵巢組織
3.產品規(guī)格:5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介:
小鼠卵巢成纖維細胞分離自卵巢組織,;卵巢是雌性動物的生殖器官,,卵巢的功能是產生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側發(fā)育(右側已退化),,呈葡萄狀,,均為處于不同發(fā)育時期的卵泡,卵泡呈黃色,,卵巢表面密布血管,。卵巢的大小與年齡和產卵期有關,。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢,,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構,而所有鳥類只有左側卵巢有機能,。卵巢是位于子宮兩側的一對卵圓形的生殖器官,,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結締組織,。卵巢的內部結構可分為皮質和髓質,。皮質位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結締組織構成,;髓質位于中央,,由疏松結締組織構成,其中有許多血管,、淋巴管和神經,。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來,;成纖維細胞較大,,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,,細胞質嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化,;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用,。剛分離的卵巢成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁*,,伸展成梭形,,胞核清晰,分布較均勻,,散在生長,,不聚集成團;細胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,,平坦,、胞體較大,細胞質透明,,細胞核較大,,呈橢圓形,顏色淡,。細胞融合,,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。卵巢成纖維細胞大多分布于卵巢表面,,其主要特點和功能:①成纖維細胞在體外易于培養(yǎng);②卵巢損傷后,,成纖維細胞能修復和重塑卵巢,;③能在卵巢炎癥時有效控制炎癥擴散。
本公司生產的采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10^5cells/瓶,;細胞經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
5.培養(yǎng)基信息:
DMEM[H],、FBS、成纖維細胞生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基(產品貨號:CM-M055)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。
三、使用方法
在技術部標準操作流程下,,小鼠肺微血管內皮細胞可傳3-5代,;建議您收到
細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,,請按照以下方法進行操作,。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,,拆下封口膜,,放入37℃、5%CO2,、飽
和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,,以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次,;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培
養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,,37℃溫浴1-3min,;倒置顯微鏡下觀察,待
細胞回縮變圓后,,再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化,;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2-1:3適當?shù)谋壤M行接種傳代,,然后補充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL,,置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),;
4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察,;之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,,胰酶消化時間不宜過長,,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),,便于和
技術部溝通,;由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請及時
和我們,,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問
題得到解決,。
5. 只可用于科研。
備注:由于實驗所用試劑,、操作環(huán)境及操作手法的不同,,以上方法僅供各實驗室參考
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