小鼠子宮平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法,、差速貼壁法，并通過上皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為T25瓶,；細胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

1.產(chǎn)品名稱：小鼠子宮平滑肌細胞
2.組織來源：子宮組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：
小鼠子宮平滑肌細胞分離自子宮組織,；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部,，膀胱與直腸之間,，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶,、盆膈,、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時,，可以引起子宮脫垂,。子宮肌層比較厚，由成束或成片的平滑肌組成,，肌束間以結(jié)締組織分隔,。子宮平滑肌具有收縮功能，收縮受激素的調(diào)節(jié),，其收縮活動有助于精子向輸卵管運送,、排出以及胎兒娩出。子宮平滑肌層含有大量的血管,，如果平滑肌層細胞過度生長,，勢必造成血管壁的增厚，管腔堵塞,，體外培養(yǎng)平滑肌細胞有利于研究子宮和其他富含血管器官的血管形成機制,。子宮平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一,，呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,，核卵圓形,、居中；2周后細胞匯合,，多數(shù)細胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富，有分枝狀突起,，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏；細胞密度低時,，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快,，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點,。子宮平滑肌細胞的主要功能：①子宮平滑肌能保持子宮的基本形態(tài),，在孕期能大化的擴張子宮容積，保證胎兒孕育環(huán)境,；②平滑肌細胞有收縮舒張能力,，在生產(chǎn)時能形成生理性的縮腹環(huán)，推動胎兒向下移動,，輔助生產(chǎn),。
本公司生產(chǎn)的采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶,；細胞經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息：
DMEM[H],、FBS,、平滑肌細胞生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：CM-M052）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。

三、使用方法
在技術(shù)部標準操作流程下,，小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞可傳3-5代,；建議您收到
細胞后盡快進行相關(guān)實驗。
客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜,，放入37℃、5%CO2,、飽
和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培
養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察,，待
細胞回縮變圓后，再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化,；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2-1:3適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；
4) 待細胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
四,、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和
技術(shù)部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時
和我們,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問
題得到解決,。
5. 只可用于科研,。
備注：由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,，以上方法僅供各實驗室參考