小鼠結(jié)腸平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法,、差速貼壁法，并通過上皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為T25瓶,；細胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

1.產(chǎn)品名稱：小鼠結(jié)腸平滑肌細胞
2.組織來源：結(jié)腸組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：
小鼠結(jié)腸平滑肌細胞分離自結(jié)腸組織,；結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸,，在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸,、橫結(jié)腸,、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分，大部分固定于腹后壁,，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M”,，將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：黏膜（上皮層,、固有層,、黏膜肌層），黏膜下層（疏松結(jié)締組織）,，肌層（內(nèi)環(huán)形,、外縱行兩層平滑肌）,，外膜（纖維膜或漿膜）,。結(jié)腸平滑肌細胞主要分布于黏膜肌層和肌層的內(nèi)環(huán)形、外縱行平滑??；結(jié)腸運動少而緩慢，對刺激的反應也較遲緩,。結(jié)腸平滑肌在食物消化與吸收,、腸道運動和物質(zhì)分泌、誘發(fā)全身炎癥反應以及細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導途徑等研究中起著重要的作用,。結(jié)腸平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一,，呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形,、居中,；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富,，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏,；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時,，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點,。結(jié)腸平滑肌運動活性受到神經(jīng)遞質(zhì),、胃腸激素和藥物等因素的調(diào)節(jié)。隨著現(xiàn)代胃腸動力學研究的進展,，對胃腸運動的研究已從器官,、組織水平發(fā)展到細胞、分子水平,，要求在胃腸道單個平滑肌細胞標本上來完成各種電生理,、藥理和分子生物學等實驗。體外培養(yǎng)細胞,，由于影響因素單一,，是研究細胞功能以及相應的細胞信號轉(zhuǎn)導機制的基礎。
本公司生產(chǎn)的采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10^5cells/瓶,；細胞經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
5.培養(yǎng)基信息：
DMEM[H],、FBS、平滑肌細胞生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：CM-M044）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。

三、使用方法
在技術部標準操作流程下,，小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞可傳3-5代,；建議您收到
細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜,，放入37℃、5%CO2,、飽
和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培
養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察,，待
細胞回縮變圓后，再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化,；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2-1:3適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；
4) 待細胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
四,、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和
技術部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時
和我們,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問
題得到解決,。
5. 只可用于科研,。
備注：由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,，以上方法僅供各實驗室參考