小鼠小腸平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合密度梯度離心法,、差速貼壁法,，并通過上皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為T25瓶,；細胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

1.產(chǎn)品名稱：小鼠小腸平滑肌細胞
2.組織來源：小腸組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：
小鼠小腸平滑肌細胞分離自小腸組織,；小腸位于腹中,，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連,，是食物消化吸收的主要場所,。小腸盤曲于腹腔內(nèi)，上連胃幽門,，下接盲腸,，分為十二指腸,、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關重要的,，因為食物經(jīng)過小腸內(nèi)胰液,、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后，基本上完成了消化過程,，同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了,。小腸管壁由粘膜、粘膜下層,、肌層和漿膜構成,。其結構特點是管壁有環(huán)形皺襞，粘膜有許多絨毛,，絨毛根部的上皮下陷至固有層,，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間,。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切,；構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞,、潘氏細胞和未分化細胞,。柱狀細胞和內(nèi)分泌細胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化,、吸收和分泌及運動功能,，其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力,，促使食物向下運動,。小腸平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展,，細胞形態(tài)大小不一,，呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,，核卵圓形、居中,；2周后細胞匯合,，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富,，有分枝狀突起,，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏；細胞密度低時,，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快,，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點,。小腸平滑肌肉瘤是起源于小腸壁肌層,、黏膜下肌層和腸壁血管平滑肌的惡性腫瘤，是小腸結締組織惡性腫瘤中常見的一種,。因此,，體外小腸平滑肌細胞的培養(yǎng)對研究小腸平滑肌肉瘤提供了基礎和前提。此外,，體外培養(yǎng)細胞,，由于影響因素較為單一，是研究細胞功能以及相應的細胞信號轉導機制的基礎,。
本公司生產(chǎn)的采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶,；細胞經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息：
DMEM[H],、FBS,、平滑肌細胞生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：CM-M043）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。

三、使用方法
在技術部標準操作流程下,，小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞可傳3-5代,；建議您收到
細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽
和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次,；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培
養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白酶消化液,，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察,，待
細胞回縮變圓后,，再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2-1:3適當?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4) 待細胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
四,、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和
技術部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時
和我們,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問
題得到解決。
5. 只可用于科研,。
備注：由于實驗所用試劑,、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實驗室參考