小鼠淋巴管內(nèi)皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、差速貼壁法,，并通過上皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為T25瓶；細胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

1.產(chǎn)品名稱：小鼠淋巴管內(nèi)皮細胞
2.組織來源：淋巴管組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：
小鼠淋巴管內(nèi)皮細胞分離自淋巴管組織；淋巴管由毛細淋巴管匯合而成,。其形態(tài)結(jié)構(gòu)與靜脈相似,，但管徑較細，管壁較薄,，瓣膜較多且發(fā)達,，外形呈串珠狀。淋巴管根據(jù)其位置分為淺、深二種,。它們管位于皮下,，常與淺靜脈伴行，收集皮膚和皮下組織的淋巴,。深淋巴管與深部血管伴行,，收集肌肉和內(nèi)臟的淋巴。淺,、深淋巴管之間有廣泛的交通支,。淋巴管在向心行程中，通常經(jīng)過一個或多個淋巴結(jié),，從而把淋巴細胞帶入淋巴液,。主要功能是濾過淋巴液，產(chǎn)生淋巴細胞和漿細胞,，參與機體的免疫反應(yīng),。當局部感染時，細菌,、病毒或癌細胞等可沿淋巴管侵入,，引起局部淋巴結(jié)腫大。如該淋巴結(jié)不能阻止和消滅它們,，則病變可沿淋巴管的流注方向擴散和轉(zhuǎn)移,。淋巴管內(nèi)皮細胞（LEC）是襯覆于淋巴管內(nèi)表面的一種單層扁平上皮，是構(gòu)成淋巴管壁的主要結(jié)構(gòu),，參與維持體液平衡,，調(diào)節(jié)淋巴細胞再循環(huán)和機體的免疫反應(yīng)和組織液及蛋白質(zhì)的運輸，在疾病過程中也起著重要作用,。近年研究表明,，LEC還在傷口愈合、淋巴管水腫和炎癥擴散等病理過程中起重要作用,，而且與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān),。淋巴管內(nèi)皮細胞主要功能：①調(diào)節(jié)體液、蛋白和組織壓力平衡,；②為免疫系統(tǒng)的重要組成部分,。淋巴管內(nèi)皮細胞與主要病生理變化：①囊腫型淋巴管瘤；②淋巴管炎,；③淋巴結(jié)核,。
本公司生產(chǎn)的采用中性蛋白酶消化法結(jié)合內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶,；細胞經(jīng)CD31/vWF免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息：
M199,、FBS,、內(nèi)皮細胞生長添加劑、Heparin,、Ascorbic Acid,、Hydrocortisone、Penicillin,、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：CM-M023）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。

三、使用方法
在技術(shù)部標準操作流程下,，小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞可傳3-5代,；建議您收到
細胞后盡快進行相關(guān)實驗。
客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜,，放入37℃、5%CO2,、飽
和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培
養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察,，待
細胞回縮變圓后，再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化,；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2-1:3適當?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4) 待細胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
四,、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和
技術(shù)部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時
和我們,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問
題得到解決,。
5. 只可用于科研,。
備注：由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,，以上方法僅供各實驗室參考