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詳細(xì)介紹
1.產(chǎn)品名稱：小鼠乳腺上皮細(xì)胞
2.組織來源：乳腺組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介：
小鼠乳腺上皮細(xì)胞分離自乳腺組織；乳腺是復(fù)管泡狀皮膚腺,，主要由腺上皮細(xì)胞組成,，并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期,，導(dǎo)管末梢發(fā)育成腺泡,；近年來的許多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的發(fā)生都與乳腺上皮細(xì)胞（MEC）有密切,，體外分離培養(yǎng)MECs即成為研究開展的關(guān)鍵步驟,。乳腺是乳房的腺體組織，乳腺由導(dǎo)管和腺泡組成,，腺泡是分泌乳汁的重要部分,。乳腺的正常發(fā)育是由體內(nèi)激素和局部合成的生長因子共同調(diào)控，其中乳腺表達(dá)的生長因子對(duì)乳腺上皮細(xì)胞的增殖,、分化,、凋亡產(chǎn)生極大的影響。乳腺上皮細(xì)胞分離自分娩后3-5天的乳腺組織,，為貼壁生長型細(xì)胞,，呈多角形、圓形以及短梭形,；乳腺上皮細(xì)胞主要功能即生乳功能,。
本公司生產(chǎn)的采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶,；細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息：
M199,、FBS,、上皮細(xì)胞生長添加劑、Hydrocortisone,、Insulin,、Transferrin、Epinephrine,、Penicillin,、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號(hào)：CM-M020）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
三,、使用方法
在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,，小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞可傳3-5代；建議您收到
細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn),。
客戶收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜，放入37℃,、5%CO2,、飽
和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次,；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培
養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液,，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察,，待
細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化,；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；
4) 待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，請(qǐng)注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，胰酶消化時(shí)間不宜過長,，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和
技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請(qǐng)及時(shí)
和我們，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問
題得到解決。
5. 只可用于科研,。
備注：由于實(shí)驗(yàn)所用試劑,、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考
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