詳細(xì)介紹
1.產(chǎn)品名稱:小鼠腮腺細(xì)胞
2.組織來源:腮腺組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介:
小鼠腮腺細(xì)胞分離自腮腺組織,;腮腺是哺乳類動物口腔中位于下頜角處的大唾液腺,,位于外耳道的前下方,,下頜后窩內(nèi)及下頜支的深面。腮腺也是某些無尾目動物頸部有毒皮膚腺的聚集體,;唾液腺有3對,,腮腺、舌下腺和頜下腺,,其中大的一對是腮腺,。腮腺細(xì)胞是高度分化的上皮源性細(xì)胞,是一種營養(yǎng)需要復(fù)雜,、在一般合成培養(yǎng)基中不易生長,,體外培養(yǎng)比較困難。目前,,DMEM培養(yǎng)液被認(rèn)為較適于腺細(xì)胞的培養(yǎng),。加入一定量的血清更有利于細(xì)胞的生長、增殖與分化,。另外,,接種的細(xì)胞密度也是培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素之一,尤其是在腺細(xì)胞這種單層細(xì)胞培養(yǎng)時,,接種的細(xì)胞總數(shù)量和生長基質(zhì)表面的細(xì)胞密度對整個細(xì)胞的生長均有影響,。
本公司生產(chǎn)的采用膠原酶-胰蛋白酶聯(lián)合消化后差速貼壁,結(jié)合上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,總量約為5×10^5cells/瓶,;細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光和α-淀粉酶檢測鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
5.培養(yǎng)基信息:
DMEM[H],、FBS、上皮細(xì)胞生長添加劑,、Hydrocortisone、Insulin,、Transferrin,、Epinephrine、Penicillin,、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:CM-M019)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。
三,、使用方法
在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞可傳3-5代,;建議您收到
細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn),。
客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作,。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,,放入37℃,、5%CO2、飽
和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細(xì)胞一次,;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培
養(yǎng)瓶底后,,吸出多余胰蛋白酶消化液,,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,,待
細(xì)胞回縮變圓后,,再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,,按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,,然后補(bǔ)充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL,置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞*貼壁后,,培養(yǎng)觀察,;之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
四,、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,,記錄細(xì)胞狀態(tài),,便于和
技術(shù)部溝通;由于運(yùn)輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請及時
和我們,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,,以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問
題得到解決。
5. 只可用于科研,。
備注:由于實(shí)驗(yàn)所用試劑,、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考