1.產(chǎn)品名稱：小鼠胰腺星狀細胞
2.組織來源：胰腺組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：
小鼠胰腺星狀細胞分離自胰腺組織,；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,，腺泡分泌胰液,，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氫鈉,、胰蛋白酶原,、脂肪酶、淀粉酶等,。胰液通過胰腺管排入十二指腸,，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用,。內(nèi)分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞,。α細胞分泌胰高血糖素,，升高血糖；β細胞分泌胰島素,，降低血糖,；γ細胞分泌生長抑素，以旁分泌的方式抑制α,、β細胞的分泌,；PP細胞分泌胰多肽，抑制胃腸運動,、胰液分泌和膽囊收縮,。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征，活化的胰腺星狀細胞（PSC）是胰腺纖維化的主要效應(yīng)細胞,，PSC分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提,。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴，并表達Desmin蛋白,，活化后的PSC則表達α-平滑肌肌動蛋白（alpha-SMA）,。PSC具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種，并分別具有特異的標志物,。靜息狀態(tài)PSC胞質(zhì)內(nèi)富含的維生素A脂滴可以被油紅O染成紅色,，陽性表達Desmin。激活狀態(tài)PSC陽性表達alpha-SMA,。油紅O染色發(fā)現(xiàn),，原代分離的細胞培養(yǎng)6d，胞漿中仍可見明顯的脂滴,，傳代后,，橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細胞化學(xué)染色顯示,，細胞接種24h仍然表達Desmin,，48h后Desmin基本不再表達。培養(yǎng)48h后絕大多數(shù)細胞開始表達alpha-SMA,，隨著培養(yǎng)時間的增長和傳代次數(shù)的增加,，細胞表達alpha-SMA，而不再表達Desmin,，說明細胞活化,。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程，至培養(yǎng)第6d大多數(shù)細胞激活,，傳代后細胞處于高度激活狀態(tài),。原代胰腺星狀細胞可作為慢性胰腺炎新藥的細胞篩選模型,，目前研究發(fā)現(xiàn)：胰腺受損時，在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細胞活化,，導(dǎo)致細胞形態(tài),、功能發(fā)生變化，促使基質(zhì)增生,、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積,。
本公司生產(chǎn)的采用膠原酶制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶,；細胞經(jīng)Desmin、alpha-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
5.培養(yǎng)基信息：
DMEM-F12、FBS,、Penicillin,、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：CM-M016）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

三,、使用方法
在技術(shù)部標準操作流程下,，小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞可傳3-5代；建議您收到
細胞后盡快進行相關(guān)實驗,。
客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜，放入37℃,、5%CO2,、飽
和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次,；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培
養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察,，待
細胞回縮變圓后，再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化,；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；
4) 待細胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
四,、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài),，便于和
技術(shù)部溝通,；由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時
和我們,，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問
題得到解決,。
5. 只可用于科研。
備注：由于實驗所用試劑,、操作環(huán)境及操作手法的不同,，以上方法僅供各實驗室參考