小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞采用組織貼塊法并結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約5×10^5cells/瓶,；細(xì)胞經(jīng)CD31/vWF免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

1.產(chǎn)品名稱：小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞
2.組織來源：肺動脈組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介：
小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞分離自肺大動脈組織,；肺大動脈亦稱肺動脈干,。在呼吸空氣的脊椎動物中，把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動脈,。肺大動脈起于右心室,，在主動脈之前向左上后方斜行，在主動脈弓下方分為左,、右肺動脈,，經(jīng)肺門入肺。肺動脈干位于心包內(nèi),，為一粗短的動脈干,。起自右心室，在升主動脈前方向左后上方斜行,，至主動脈弓下方分為左,、右肺動脈,。左肺動脈較短,，在左主支氣管前方橫行，分二支進(jìn)入左肺上,、下葉,。右肺動脈較長而粗,，經(jīng)升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行，至右肺門處分為三支進(jìn)入右肺上,、中,、下葉。肺大動脈平滑肌細(xì)胞是肺血管的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一,，在調(diào)控肺血管的收縮和舒張功能中有重要作用,。肺大動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展,，細(xì)胞形態(tài)大小不一,，呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,，核卵圓形、居中,；2周后細(xì)胞匯合,，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富,，有分枝狀突起,，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏,；細(xì)胞密度低時(shí),，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí),，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn),。肺大動脈平滑肌細(xì)胞的異常是肺動脈高壓發(fā)生發(fā)展的重要病理學(xué)特征，其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的關(guān)鍵,。研究表明,，急性和慢性缺氧均可導(dǎo)致肺動脈高壓，即缺氧性肺動脈高壓,，推斷缺氧可能是通過促進(jìn)肺大動脈平滑肌細(xì)胞的增殖而參與缺氧性肺動脈高壓的發(fā)生發(fā)展,。肺大動脈平滑肌細(xì)胞主要功能：①細(xì)胞表面表達(dá)介質(zhì)（ICAM-1和VCAM-1）參與血管壁炎癥反應(yīng)；②是多數(shù)重要?jiǎng)用}疾病的靶細(xì)胞,。肺大動脈平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化：①平滑肌增生易致肺動脈高壓,；②先天性肺動脈狹窄；③肺動脈栓塞,。
本公司生產(chǎn)的采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶,；細(xì)胞經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
5.培養(yǎng)基信息：
DMEM[H],、FBS、平滑肌細(xì)胞生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：CM-M010）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

 

三,、使用方法
在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,，小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞可傳3-5代；建議您收到
細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn),。
客戶收到細(xì)胞后,，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜，放入37℃,、5%CO2,、飽
和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次,；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培
養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液,，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察，待
細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化,；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；
4) 待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，胰酶消化時(shí)間不宜過長,，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和
技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時(shí)
和我們，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問
題得到解決。
5. 只可用于科研,。
備注：由于實(shí)驗(yàn)所用試劑,、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考