詳細介紹
1.產(chǎn)品名稱:小鼠肺大靜脈平滑肌細胞
2.組織來源:肺靜脈組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介:
小鼠肺大靜脈平滑肌細胞分離自肺大靜脈組織,;肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中,,把動脈血由肺送回心臟的靜脈,是一個靜脈里流動脈血的血管,。左右1對,,共4條,兩條連接右肺,,兩條連接左肺,。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接,而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位,。肺靜脈淤血性肺動脈高壓,,是由于肺靜脈內血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下,,肺循環(huán)具有血壓低,、阻力小和順應性大的特點,肺動脈壓力高低取決于單位時間內肺動脈血流量和肺血管的阻力,,要維持肺循環(huán)的低壓,、低阻的狀態(tài),必須保證整個肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻,,血液順利地由肺動脈經(jīng)毛細血管進入肺靜脈,,再入左心室,經(jīng)過左心室收縮進入體循環(huán),,才能避免肺動脈內壓力升高,。肺大靜脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,,呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,,核卵圓形,、居中;2周后細胞匯合,,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,有分枝狀突起,,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏;細胞密度低時,,常交織成網(wǎng)狀,;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快,,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點,。該細胞參與血管壁炎癥反應,,保持靜脈管腔的通暢,還是多數(shù)動脈疾病的靶細胞,。
本公司生產(chǎn)的采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;細胞經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
5.培養(yǎng)基信息:
DMEM[H]、FBS,、平滑肌細胞生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:CM-M009)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。
三、使用方法
在技術部標準操作流程下,小鼠肺微血管內皮細胞可傳3-5代,;建議您收到
細胞后盡快進行相關實驗,。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作,。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,,放入37℃,、5%CO2、飽
和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,,以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細胞一次,;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培
養(yǎng)瓶底后,,吸出多余胰蛋白酶消化液,,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,,待
細胞回縮變圓后,,再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,,按1:2-1:3適當?shù)谋壤M行接種傳代,,然后補充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL,置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4) 待細胞*貼壁后,,培養(yǎng)觀察,;之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
四,、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,,記錄細胞狀態(tài),,便于和
技術部溝通;由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請及時
和我們,詳盡告知細胞的具體情況,,以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問
題得到解決。
5. 只可用于科研,。
備注:由于實驗所用試劑,、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考
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