詳細(xì)介紹
1.產(chǎn)品名稱:小鼠支氣管上皮細(xì)胞
2.組織來(lái)源:支氣管組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠支氣管上皮細(xì)胞分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),,是指由氣管分出的各級(jí)分枝,,由氣管分出的一級(jí)支氣管,即左,、右主支氣管,。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細(xì)長(zhǎng),,走向傾斜,;后者較粗短,,走向較前者略直,所以經(jīng)氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管,。支氣管和氣管還有以區(qū)別就是,,氣管是以“C”型的氣管軟骨為支架,而支氣管不是,。支氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的*道防線,,不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞,,還作為效應(yīng)細(xì)胞合成,、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子,從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng),。支氣管上皮細(xì)胞在哮喘,、慢性阻塞性肺疾病、肺癌,、肺囊性纖維化以及一些感染性呼吸道疾病的發(fā)病機(jī)制中均起著重要的作用,。體外培養(yǎng)的原代支氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上存在很大的相似性,因此,,在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要,。
本公司生產(chǎn)的采用中性蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合機(jī)械刮刷并通過(guò)上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶,;細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息:
M199,、FBS,、上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、Hydrocortisone,、Insulin,、Transferrin、Epinephrine,、Penicillin,、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號(hào):CM-M007)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
三,、使用方法
在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,,小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞可傳3-5代,;建議您收到
細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后,,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,,拆下封口膜,,放入37℃、5%CO2,、飽
和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培
養(yǎng)瓶底后,,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min,;倒置顯微鏡下觀察,,待
細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化,;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,,然后補(bǔ)充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL,,置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),;
4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察,;之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),,否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,,記錄細(xì)胞狀態(tài),,便于和
技術(shù)部溝通,;由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請(qǐng)及時(shí)
和我們,,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問(wèn)
題得到解決,。
5. 小鼠氣管上皮細(xì)胞只可用于科研。
備注:由于實(shí)驗(yàn)所用試劑,、操作環(huán)境及操作手法的不同,,以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考