1.產(chǎn)品名稱：小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞
2.組織來源：肺組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：
小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞分離自肺組織,；肺泡由單層上皮細胞構(gòu)成的半球狀囊泡,。肺中的支氣管經(jīng)多次反復(fù)分枝成無數(shù)細支氣管，它們的末端膨大成囊,，囊的四周有很多突出的小囊泡,，即為肺泡。小肺泡細胞,，又稱I型肺泡細胞,，厚約0.1微米，基底部是基底膜,，無增殖能力,。大肺泡細胞，又稱Ⅱ型肺泡細胞,，分泌表面活性物質(zhì)（二棕櫚酰卵磷脂）,，以降低肺泡表面張力,。Ⅱ型肺泡細胞位于Ⅰ型肺泡細胞之間，數(shù)量較Ⅰ型肺泡細胞多,，但覆蓋面積比Ⅰ型肺泡細胞小,。細胞立方形或圓形,頂端突入肺泡腔。細胞核圓形,，胞質(zhì)著色淺,、呈泡沫狀。電鏡下,，細胞游離而有少量微絨毛,，胞質(zhì)內(nèi)富含線粒體和溶酶體，有較發(fā)達的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體,。核上方有較多的分泌顆粒,，電子密度高、大小不等,，直徑約0.1-1.0μm顆粒內(nèi)含有平行排列的板層狀結(jié)構(gòu),，稱為嗜餓性板層小體。小體內(nèi)的主要成分為磷脂,，以二棕櫚酰卵磷脂為主,，此外還有糖胺多糖及蛋白質(zhì)等。顆粒內(nèi)物質(zhì)釋放出來后,，在肺泡表面形成一層粘液層,，稱為表面活性物質(zhì)（surfactant）。表面活性物質(zhì)有降低肺泡表面張力,、穩(wěn)定肺泡大小的作用,。呼氣時肺泡縮小，表面活性物質(zhì)密度增加,，表面張力降低,，防止肺泡過度塌陷；吸氣時肺泡擴張,，表面活性物質(zhì)密度減小,，肺泡回縮力加大，可防止肺泡過度膨脹,。表面活性物質(zhì)的缺乏或變性均可引起肺不張,，過度通氣可造成表面活性物質(zhì)缺乏；吸入毒氣可直接破壞表面活性物質(zhì),。Ⅱ型肺泡細胞有分裂,、增殖并分化為Ⅰ型肺泡細胞的潛能，故具有修復(fù)受損傷上皮的作用。
本公司生產(chǎn)的采用胰蛋白酶-膠原酶混合灌注消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過上皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經(jīng)SP-C免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
5.培養(yǎng)基信息：
M199、FBS,、上皮細胞生長添加劑,、Hydrocortisone、Insulin,、Transferrin,、Epinephrine、Penicillin,、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：CM-M003）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。

三、使用方法
在技術(shù)部標準操作流程下,，小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞可傳3-5代,；建議您收到
細胞后盡快進行相關(guān)實驗。
客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜,，放入37℃、5%CO2,、飽
和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次,；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培
養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察,，待
細胞回縮變圓后，再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化,；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2-1:3適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；
4) 待細胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
四,、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài),，便于和
技術(shù)部溝通,；由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時
和我們,，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問
題得到解決,。
5. 小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞胞只可用于科研。
備注：由于實驗所用試劑,、操作環(huán)境及操作手法的不同,，以上方法僅供各實驗室參考