詳細(xì)介紹
大鼠糖化血紅蛋白(GHb)Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記,。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性,。在測(cè)定時(shí),,受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi),。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例,。加入酶反應(yīng)的底物后,,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),,故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析,。
規(guī)格:48T 96T
檢 測(cè) 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測(cè)定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量,。
標(biāo) 本 要 求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性,。
大鼠糖化血紅蛋白(GHb)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標(biāo)記抗體
①抗原: IgG
②酶標(biāo)抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,NaHCO3 1.46g,,水溶解,定容500ml,。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA,。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,,Na2HPO4·12H2O 58g,,NaCl 160g, KCl 4g,,Tween-20 10mL 加水定容2L,。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱(chēng)NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,,用蒸餾水溶解,,定容至1000mL,,調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液:稱(chēng)3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,,加60 mL 甲醇,,混勻,加100mL 底物緩沖液,,在暗處避光攪拌2小時(shí)至溶解,,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL過(guò)氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻,。 ④底物應(yīng)用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,,TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
大鼠糖化血紅蛋白(GHb)Elisa試劑盒操作步驟
①抗原包被過(guò)夜(12h以上): IgG抗原,,用包被液(CBS)稀釋?zhuān)?00μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中,。4℃放置過(guò)夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,,37℃放置2h,。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測(cè)樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽(yáng)性對(duì)照,。37℃恒溫箱溫育2h。 測(cè)免疫效價(jià)待測(cè)樣品為小鼠血清時(shí):采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,,3000r 10min離心,。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開(kāi)始),100μL /孔,。每個(gè)樣品平行做兩份,,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,已知樣品作為陽(yáng)性對(duì)照,。37℃恒溫箱溫育2h,。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次。
⑥加二抗(酶標(biāo)抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,,用1%BSA+PBST l :10000稀釋?zhuān)?00μL/孔,, 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍(lán)色,。
⑨終止反應(yīng),、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標(biāo)儀測(cè)定450nm 630nm處各孔的吸光值,,陽(yáng)性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測(cè)樣品的效價(jià),。
大鼠糖化血紅蛋白(GHb)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
ZQ0058 LOVO人結(jié)腸癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0059 MGC-803人胃癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0060 NCI-N87人胃癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0487 PC-9人肺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0061 SW-620人結(jié)腸癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0062 SGC-7901人胃癌細(xì)胞(不建議銷(xiāo)售) 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0063 SW480人結(jié)腸癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0490 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0064 BxPC-3人原位胰腺腺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0491 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞T/G HA-VSMC 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0065 PANC-1人胰腺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0066 Ca Ski人宮頸癌腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0067 ES-2人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0494 人卵巢癌細(xì)胞系 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0069 HO-8910人卵巢癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0495 人二倍體細(xì)胞系 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0070 HT-3人子宮頸癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0071 MCF-7人乳腺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0072 MDA-MB-453人乳腺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0073 OV-90人卵巢癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0074 SK-OV-3人卵巢腺瘤細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0075 TOV-112D人上皮性卵巢癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0076 WISH人羊膜/羊膜成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0077 ZR-75-1人乳腺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0079 EA.hy926人臍靜脈融合細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0080 SK-BR-3人乳腺腺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0081 Hep-2人喉癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0082 KB人口腔表皮樣癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0083 Jurkat,,Clone E6-1人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0084 Raji人Burkitts淋巴瘤細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0509 人小腸癌細(xì)胞系 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0085 SJCRH30人骨髓橫紋肌肉癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0510 人腺癌細(xì)胞系 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0086 Thp-1人單核細(xì)胞白血病 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0087 U-937人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0513 Hela 細(xì)胞耐藥亞株 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0514 COC1細(xì)胞耐藥亞株 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0518 人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞系 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0519 人胃癌細(xì)胞系 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0520 人胸腺激酶缺陷細(xì)胞系 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0522 人二倍體細(xì)胞系 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0530 Burkitts淋巴瘤細(xì)胞系 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0107 A-673人橫紋肌肉瘤細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0534 人卵巢腺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0110 Tca-8113人舌鱗癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0111 NCI-H460人肺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0536 膀胱癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0112 BGC-803人胃癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0537 急性骨髓性白血病細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0538 SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0114 5637人膀胱癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0115 A2058人皮膚癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0116 人乳腺癌細(xì)胞BcaP-37(暫不提供) 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0118 MDA-MB-231人乳腺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0543 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0120 T-24人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0121 U-2OS人骨肉瘤細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0122 EB-3人淋巴樣Burkitt淋巴瘤細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0123 L-CELLS L細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0548 人肝癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0124 COLO205人結(jié)腸癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0125 HCT-116人結(jié)腸癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0551 表達(dá)HBV病毒的人肝細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0126 CCRF-CEM [CCRF CEM]人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0127 LS 174T人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0554 人口腔癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0129 SiHa人子宮頸鱗癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0558 B淋巴細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0560 人小細(xì)胞肺癌 5 x 10^5 cells/vial