詳細(xì)介紹
大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記,。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,,又保留酶的活性。在測定時(shí),,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開,。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上,。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析,。
規(guī)格:48T 96T
檢 測 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量,。
標(biāo) 本 要 求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標(biāo)記抗體
①抗原: IgG
②酶標(biāo)抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,,NaHCO3 1.46g,,水溶解,,定容500ml。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA,。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 ,。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,,Na2HPO4·12H2O 58g,NaCl 160g,, KCl 4g,Tween-20 10mL 加水定容2L,。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,,用蒸餾水溶解,定容至1000mL,,調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,,加60 mL 甲醇,混勻,,加100mL 底物緩沖液,,在暗處避光攪拌2小時(shí)至溶解,,4℃避光保存,。 ③H2O2 底物液:取140μL過氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應(yīng)用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,,TMB:H2O2=1:1混勻,。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)Elisa試劑盒操作步驟
①抗原包被過夜(12h以上): IgG抗原,,用包被液(CBS)稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中,。4℃放置過夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,,37℃放置2h。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,,空白培養(yǎng)基作為陰性對照,,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h,。 測免疫效價(jià)待測樣品為小鼠血清時(shí):采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,3000r 10min離心,。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開始),100μL /孔,。每個樣品平行做兩份,,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照,,已知樣品作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h,。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次,。
⑥加二抗(酶標(biāo)抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,,100μL/孔, 37℃恒溫箱溫育1h,。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍(lán)色,。
⑨終止反應(yīng)、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃,;用酶標(biāo)儀測定450nm 630nm處各孔的吸光值,陽性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測樣品的效價(jià),。
大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
B1000 牛腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
B2300 牛真皮成纖維細(xì)胞 1 x 10^6 cells/vial
ZQ0234 人食管癌細(xì)胞Eca-109 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0002 95-D人肺癌細(xì)胞(高轉(zhuǎn)) 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0003 A549人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0001 16HBE 人支氣管上皮細(xì)胞(atcc引進(jìn),,代數(shù)靠前) 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0004 HELF人胚肺成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0433 HL-60人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0005 Hs888Lu人肺成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0006 MRC-5人胚肺細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0007 NCI-H1299人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0008 NCI-H446人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0009 NCI-H1755人肺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0010 NCI-H838人肺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0011 NCI-H1563人胚肺細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0012 NCI-H2170人肺鱗癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0013 NCI-H596人肺鱗癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0014 NCI-H520人肺鱗癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0015 NCI-H1703人肺鱗癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0016 NCI-H226人肺鱗癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0017 NCI-H647人肺小細(xì)胞癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0018 SPC-A-1人肺腺癌細(xì)胞(暫不供應(yīng)) 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0019 MHCC97-L人肝癌細(xì)胞(低轉(zhuǎn)) 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0020 MHCC97-H人肝癌細(xì)胞(高轉(zhuǎn)) 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0021 Bel-7404人肝癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0022 Hep-G2人肝癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0023 HCCLM3人肝癌細(xì)胞(高轉(zhuǎn)) 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0024 Hep 3B2.1-7人肝癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0025 huh-7人肝癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0027 PLC/PRF/5人肝癌亞力山大細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0028 QGY-7703人肝癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0029 SMMC-7721人肝癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0030 SK-HEP-1人肝癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0031 LO2人正常肝細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0032 293FT人胚腎細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0033 293T人胚腎細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0034 HEK-293人胚腎細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0035 β-tc-6小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0036 22RV1人前列腺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0037 DU 145人前列腺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0038 HS 1.Tes人正常睪丸細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0039 LNcapcloneFGC人前列腺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0040 PC-3人前列腺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0041 PC-3M人前列腺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0042 A375人惡性黑色素瘤細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0043 A431人表皮癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0044 Hacat人永生化表皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0045 M-14人黑色素瘤細(xì)胞(暫停銷售) 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0046 TE354.T人皮膚基底細(xì)胞癌 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0047 TE353.sk人正常皮膚細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0048 A172人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0049 Hs683人腦視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0050 SH-SY5Y人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0480 CNE2人鼻咽癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0051 SK-N-AS人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0481? SW839?人腎癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0052 SHG-44人膠質(zhì)瘤細(xì)胞(不建議出售) 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0482? HTR-8/SVneo 人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0053 U251人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0054 U-87 MG人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0484 人卵巢腺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0055 BGC-823人胃癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0485 人IgA-骨髓瘤細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0056? Caco-2人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0486 人卵巢癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0057 HT-29人結(jié)腸癌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial