詳細(xì)介紹
大鼠心房鈉尿肽/心鈉素(ANP)Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記,。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,,又保留酶的活性,。在測定時(shí),受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng),。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開,。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上,。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例,。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),,故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
規(guī)格:48T 96T
檢 測 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測定山羊血清,、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量,。
標(biāo) 本 要 求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠心房鈉尿肽/心鈉素(ANP)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標(biāo)記抗體
①抗原: IgG
②酶標(biāo)抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,,NaHCO3 1.46g,,水溶解,定容500ml,。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA,。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,,Na2HPO4·12H2O 58g,,NaCl 160g, KCl 4g,,Tween-20 10mL 加水定容2L,。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,,用蒸餾水溶解,,定容至1000mL,調(diào)PH=3.6,。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,,加60 mL 甲醇,,混勻,加100mL 底物緩沖液,,在暗處避光攪拌2小時(shí)至溶解,,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL過氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻,。 ④底物應(yīng)用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,,TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
大鼠心房鈉尿肽/心鈉素(ANP)Elisa試劑盒操作步驟
①抗原包被過夜(12h以上): IgG抗原,,用包被液(CBS)稀釋,,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過夜,。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,,37℃放置2h。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,,空白培養(yǎng)基作為陰性對照,,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h,。 測免疫效價(jià)待測樣品為小鼠血清時(shí):采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,,3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開始),,100μL /孔,。每個(gè)樣品平行做兩份,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照,,已知樣品作為陽性對照,。37℃恒溫箱溫育2h。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次,。
⑥加二抗(酶標(biāo)抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,100μL/孔,, 37℃恒溫箱溫育1h,。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍(lán)色,。
⑨終止反應(yīng),、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標(biāo)儀測定450nm 630nm處各孔的吸光值,,陽性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測樣品的效價(jià),。
大鼠心房鈉尿肽/心鈉素(ANP)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
1000 人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 13362
1100 人腦血管平滑肌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 11304
1110 人腦血管外膜成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 11502
1200 人腦血管周細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 12258
1300 人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 13050
1310 人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 13446
1320 人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 11304
1400 人腦膜細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 11502
1410 人軟腦膜周細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 12078
1520 人神經(jīng)元 1 x 10^6 cells/vial 12258
1530 人小腦顆粒細(xì)胞 1 x 10^6 cells/vial 12474
1540 人海馬趾神經(jīng)元 1 x 10^6 cells/vial 12276
1550 人大腦皮層神經(jīng)元 1 x 10^6 cells/vial 12276
1560 人腦干神經(jīng)元 1 x 10^6 cells/vial 12456
1600 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞 1 x 10^6 cells/vial 12078
1610 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞--球形 1 x 10^6 cells/vial 19278
1650 HiPSC人源性神經(jīng)干細(xì)胞 1 x 10^6 cells/vial 11322
1700 人雪旺細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 13500
1710 人神經(jīng)束膜細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 11304
1800 人星形膠質(zhì)細(xì)胞 1 x 10^6 cells/vial 11412
1810 人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 11502
1820 人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 11502
1830 人海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 11502
1840 人星形膠質(zhì)細(xì)胞--腦干 5 x 10^5 cells/vial 11502
1850 人星形膠質(zhì)細(xì)胞 - 中腦 5 x 10^5 cells/vial 11502
1870 人視網(wǎng)膜星形膠質(zhì)細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 11502
1900 人小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞 1 x 10^5 cells/vial 13446
2000 人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 9936
2010 人真皮淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 10710
2020 人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞-成人 5 x 10^5 cells/vial 10134
2100 人表皮角質(zhì)細(xì)胞--新生 5 x 10^5 cells/vial 7020
2110 人表皮角質(zhì)細(xì)胞--成人 5 x 10^5 cells/vial 6840
2120 人表皮角質(zhì)細(xì)胞--胎兒 5 x 10^5 cells/vial 7200
2200 人表皮黑色素細(xì)胞--淺色素 5 x 10^5 cells/vial 8172
2210 人表皮黑色素細(xì)胞--中色素 5 x 10^5 cells/vial 8388
2220 人表皮黑色素細(xì)胞--深色素 5 x 10^5 cells/vial 8388
2230 人黑色素細(xì)胞--成人 5 x 10^5 cells/vial 7992
2300 人真皮成纖維細(xì)胞--胎兒 5 x 10^5 cells/vial 8172
2310 人真皮成纖維細(xì)胞--新生 5 x 10^5 cells/vial 6228
2320 人真皮成纖維細(xì)胞--成人 5 x 10^5 cells/vial 4284
2400 人毛乳頭細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 12276