詳細介紹
大鼠血管生成素2(ANG-2)Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記,。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,,又保留酶的活性,。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應,。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開,。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結(jié)合在固相載體上,。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例,。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。
規(guī)格:48T 96T
檢 測 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測定山羊血清,、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量,。
標 本 要 求
1.標本采集后盡早進行提取,,提取按相關(guān)文獻進行,,提取后應盡快進行實驗,。若不能
馬上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,,但應避免反復凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
大鼠血管生成素2(ANG-2)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標記抗體
①抗原: IgG
②酶標抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,,NaHCO3 1.46g,,水溶解,,定容500ml。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA,。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 ,。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,Na2HPO4·12H2O 58g,,NaCl 160g,, KCl 4g,,Tween-20 10mL 加水定容2L。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,,C6H8O7·H2O :1.05g,,用蒸餾水溶解,定容至1000mL,,調(diào)PH=3.6,。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,加60 mL 甲醇,,混勻,,加100mL 底物緩沖液,在暗處避光攪拌2小時至溶解,,4℃避光保存,。 ③H2O2 底物液:取140μL過氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,,TMB:H2O2=1:1混勻,。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
大鼠血管生成素2(ANG-2)Elisa試劑盒操作步驟
①抗原包被過夜(12h以上): IgG抗原,用包被液(CBS)稀釋,,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應板中,。4℃放置過夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,,37℃放置2h,。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測樣品為細胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,空白培養(yǎng)基作為陰性對照,,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽性對照,。37℃恒溫箱溫育2h。 測免疫效價待測樣品為小鼠血清時:采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,,3000r 10min離心,。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開始),100μL /孔,。每個樣品平行做兩份,,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品作為陽性對照,。37℃恒溫箱溫育2h,。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次。
⑥加二抗(酶標抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,,100μL/孔, 37℃恒溫箱溫育1h,。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍色,。
⑨終止反應,、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標儀測定450nm 630nm處各孔的吸光值,,陽性反應的zui大稀釋度為待測樣品的效價,。
大鼠血管生成素2(ANG-2)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
YS06966B 小鼠白介素10(IL-10)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06967B 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06968B 小鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06969B 小鼠趨化因子(FK)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06970B 小鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06971B 小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06972B 小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06973B 小鼠白細胞分化抗原30(CD30)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06974B 小鼠活化素A(Activin-A)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06975B 小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06976B 小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06977B 小鼠可溶性白細胞分化抗原30(sCD30)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06978B 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC) 酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06979B 小鼠神經(jīng)生長導向因子Slit2 酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06980B 小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06981B 小鼠胰島素自身抗體(IAA)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06982B 小鼠載脂蛋白H(Apo-H)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06983B 小鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06984B 小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06985B 小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06986B 小鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06987B 小鼠溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06988B 小鼠蛋白磷酸酶(PP)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06989B 小鼠膠原酶II(Collagenase II)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06990B 小鼠膠原酶I(Collagenase I)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06991B 小鼠丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06992B 小鼠組織蛋白酶K(cath-K)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06993B 小鼠腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06994B 小鼠熱休克蛋白27(HSP-27)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06995B 小鼠信號轉(zhuǎn)導分子(Smad1)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06996B 小鼠細胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06997B 小鼠乳腺腫瘤病毒(MMTV)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06998B 小鼠TGF-β誘導早期基因1(TIEG1)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06999B 小鼠視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07000B 小鼠結(jié)腸癌抗原(CCA)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07001B 小鼠表面膜免疫球蛋白A(mIgA)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07002B 小鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07003B 小鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07004B 小鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07005B 小鼠胃蛋白酶(Pepsin)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒