詳細(xì)介紹
大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記,。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,,又保留酶的活性,。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng),。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開,。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上,。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例,。加入酶反應(yīng)的底物后,,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),,故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析,。
規(guī)格:48T 96T
檢 測(cè) 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測(cè)定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量,。
標(biāo) 本 要 求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性,。
大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標(biāo)記抗體
①抗原: IgG
②酶標(biāo)抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,NaHCO3 1.46g,,水溶解,,定容500ml。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA,。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 ,。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,Na2HPO4·12H2O 58g,,NaCl 160g,, KCl 4g,Tween-20 10mL 加水定容2L,。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,,C6H8O7·H2O :1.05g,用蒸餾水溶解,,定容至1000mL,,調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,,加60 mL 甲醇,,混勻,加100mL 底物緩沖液,,在暗處避光攪拌2小時(shí)至溶解,,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL過(guò)氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻,。 ④底物應(yīng)用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,,TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶Elisa試劑盒操作步驟
①抗原包被過(guò)夜(12h以上): IgG抗原,用包被液(CBS)稀釋,,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中,。4℃放置過(guò)夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,,37℃放置2h,。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測(cè)樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽(yáng)性對(duì)照,。37℃恒溫箱溫育2h。 測(cè)免疫效價(jià)待測(cè)樣品為小鼠血清時(shí):采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,,3000r 10min離心,。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開始),100μL /孔,。每個(gè)樣品平行做兩份,,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,已知樣品作為陽(yáng)性對(duì)照,。37℃恒溫箱溫育2h,。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次。
⑥加二抗(酶標(biāo)抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,,100μL/孔, 37℃恒溫箱溫育1h,。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,37℃恒溫箱放置10min,,顯示藍(lán)色,。
⑨終止反應(yīng)、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃,;用酶標(biāo)儀測(cè)定450nm 630nm處各孔的吸光值,,陽(yáng)性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測(cè)樣品的效價(jià)。
大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
YS07007B 小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07008B 小鼠C型鈉尿肽(CNP)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07009B 小鼠α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07010B 小鼠同型半胱氨酸(Hcy)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07011B 小鼠糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07012B 小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07013B 小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07014B 小鼠丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1) 酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07015B 小鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07016B 小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07017B 小鼠阿立新A(Orexin A)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07018B 小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07019B 小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07020B 小鼠腎損傷分子1(Kim-1)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07021B 小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07022B 小鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07023B 小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07024B 小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07025B 小鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07026B 小鼠血清一氧化氮(NO)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07027B 小鼠apelin 12(AP12)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07028B 小鼠過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07029B 小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07030B 小鼠16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07031B 小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07032B 小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07033B 小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07034B 小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07035B 小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07036B 小鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07037B 小鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07038B 小鼠妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07039B 小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α (sm Actinin-α)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07040B 小鼠肌球蛋白(Myosin)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07041B 小鼠結(jié)蛋白(Des)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒