大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子BElisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,，又保留酶的活性。在測定時(shí),，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開,。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例,。加入酶反應(yīng)的底物后,，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析,。

規(guī)格：48T   96T

檢 測 范 圍 ：7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 ：本試劑盒用于測定山羊血清,、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。

標(biāo) 本 要 求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子BElisa試劑盒試劑及試劑配制
 1. 抗原及酶標(biāo)記抗體 
①抗原： IgG 
②酶標(biāo)抗抗體：羊抗鼠IgG-HRP 
2.包被液（CBS）：Na2CO3   0.8g,，NaHCO3  1.46g，水溶解,，定容500ml,。  
3. 封閉液（3％BSA+CBS 或5％牛奶+CBS）：含3％牛血清白蛋白（BSA）：10mL CBS中加入0.3g BSA。含5％荷蘭牛奶：10mL CBS中加入0.5g牛奶 ,。 
4. 洗滌液（PBST 10*）：KH2PO4   4g,，Na2HPO4·12H2O    58g，NaCl   160g,， KCl  4g,，Tween-20 10mL  加水定容2L。  
5. 洗滌液(1*PBS)： PBST：H2O=1：9 
6. 底物溶液（4甲基酰苯氨） ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液)：稱NaAc·3H2O：1.13g,，C6H8O7·H2O ：1.05g,，用蒸餾水溶解，定容至1000mL,，調(diào)PH=3.6,。 ② TMB底物液：稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜（DMSO）中，加60 mL 甲醇,，混勻,，加100mL 底物緩沖液，在暗處避光攪拌2小時(shí)至溶解,，4℃避光保存,。 ③H2O2 底物液：取140μL過氧化氫（H2O2）加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應(yīng)用液：現(xiàn)用現(xiàn)配,，TMB:H2O2=1:1混勻,。 
7. 終止液：2mol/L H2SO4 

操作步驟
 ①抗原包被過夜（12h以上）： IgG抗原，用包被液（CBS）稀釋,，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中,。4℃放置過夜,。 抗原用量：0.1μg*100N/抗原濃度 （N為板數(shù)）
②封閉：棄上清 加300μL/孔封閉液，37℃放置2h,。 
③洗滌：用洗滌液洗3次 
④加一抗(待測樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清)：將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,，空白培養(yǎng)基作為陰性對照，已知樣品血清（1：200稀釋于1%BSA+PBST中）作為陽性對照,。37℃恒溫箱溫育2h,。 測免疫效價(jià)待測樣品為小鼠血清時(shí)：采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清，3000r 10min離心,。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1：200開始),，100μL /孔。每個(gè)樣品平行做兩份,，小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照,，已知樣品作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h,。 
⑤洗滌：用洗滌液洗5次,。 
⑥加二抗（酶標(biāo)抗抗體）：羊抗鼠IgG-HRP，用1%BSA+PBST l ：10000稀釋,，100μL／孔,， 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌：用洗滌液洗5次,， 
⑧顯色：加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,，37℃恒溫箱放置10min，顯示藍(lán)色,。 
⑨終止反應(yīng),、比色：加30μL/孔H2SO4終止液．顏色變黃；用酶標(biāo)儀測定450nm  630nm處各孔的吸光值,，陽性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測樣品的效價(jià),。

相關(guān)產(chǎn)品如下：

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YS07246B    雞熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
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YS07249B    雞細(xì)胞色素P450(CYP450)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07250B    雞腺病毒抗體(ADV-Ab)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07251B    雞新城疫病毒(NDV)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
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YS07253B    堿性木聚糖酶測定酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07254B    角鯊烯環(huán)氧化酶酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07255B    金黃色葡萄球菌腸毒素(SE)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07256B    昆蟲20羥基蛻皮酮(20-HYD)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07257B    孔雀石綠(malachitegreen，MG)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07258B    昆蟲卵黃蛋白原(VTG)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07259B    昆蟲三磷酸腺苷(ATP)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
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YS07261B    鄰苯二甲酸酯(DEHP)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07262B    鄰苯二甲酸酯(PAEs)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07263B    鹿副結(jié)核(M.pt)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
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YS07265B    馬巴貝斯蟲(B.equi)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07266B    馬鼻疽(Glanders)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07267B    馬傳染性貧血病抗體(IHA-Ab)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07268B    馬駑巴貝斯蟲(babesiosis)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07269B    馬駑巴貝斯蟲抗體(babesiosis-Ab)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07270B    馬泰勒蟲病抗體(theileriasis-Ab)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07271B    綿羊核苷酸(Nucleotide)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07272B    綿羊肌苷(Inosine)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07273B    尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGP)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07274B    尿素(Urea)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒