詳細介紹
大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記,。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性,。在測定時,,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開,。再加入酶標記的抗原或抗體,,也通過反應而結合在固相載體上,。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例,。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關,,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。
規(guī)格:48T 96T
檢 測 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測定山羊血清,、血漿及相關液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量,。
標 本 要 求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,,提取后應盡快進行實驗,。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,,但應避免反復凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標記抗體
①抗原: IgG
②酶標抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,,NaHCO3 1.46g,,水溶解,定容500ml,。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA,。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,,Na2HPO4·12H2O 58g,,NaCl 160g, KCl 4g,Tween-20 10mL 加水定容2L,。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,,C6H8O7·H2O :1.05g,用蒸餾水溶解,,定容至1000mL,,調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,,加60 mL 甲醇,,混勻,加100mL 底物緩沖液,,在暗處避光攪拌2小時至溶解,,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL過氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻,。 ④底物應用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,,TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)Elisa試劑盒操作步驟
①抗原包被過夜(12h以上): IgG抗原,,用包被液(CBS)稀釋,,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應板中。4℃放置過夜,。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,,37℃放置2h。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測樣品為細胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,,空白培養(yǎng)基作為陰性對照,,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h,。 測免疫效價待測樣品為小鼠血清時:采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,,3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開始),,100μL /孔,。每個樣品平行做兩份,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照,,已知樣品作為陽性對照,。37℃恒溫箱溫育2h。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次,。
⑥加二抗(酶標抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,100μL/孔,, 37℃恒溫箱溫育1h,。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,37℃恒溫箱放置10min,,顯示藍色,。
⑨終止反應、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃,;用酶標儀測定450nm 630nm處各孔的吸光值,,陽性反應的zui大稀釋度為待測樣品的效價。
大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)Elisa試劑盒相關產(chǎn)品如下:
YS02016B | 人絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)Elisa試劑盒 |
YS02017B | 人溶菌酶(LZM)Elisa試劑盒 |
YS02018B | 人黏著斑激酶(FAK)Elisa試劑盒 |
YS02019B | 人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)Elisa試劑盒 |
YS02020B | 人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)Elisa試劑盒 |
YS02021B | 人精氨酸酶(Arg)Elisa試劑盒 |
YS02022B | 人中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)Elisa試劑盒 |
YS02023B | 人間變性淋巴瘤激酶(ALK)Elisa試劑盒 |
YS02024B | 人激動異構酶/細胞分裂素MB(CKMB)Elisa試劑盒 |
YS02025B | 人肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)Elisa試劑盒 |
YS02026B | 人谷胱甘肽硫轉移酶pi基因(GSTpi)Elisa試劑盒 |
YS02027B | 人谷胱甘肽S轉移酶(GST)Elisa試劑盒 |
YS02028B | 人泛素分解酶(DUB)Elisa試劑盒 |
YS02029B | 人分泌型磷脂酶A2(sPLA2)Elisa試劑盒 |
YS02030B | 人泛素連接酶(E3/UBPL)Elisa試劑盒 |
YS02031B | 人肥大細胞類胰蛋白酶(MCT)Elisa試劑盒 |
YS02032B | 人多巴色素異構酶(DT)Elisa試劑盒 |
YS02033B | 人泛素結合酶(E2/UBCE)Elisa試劑盒 |
YS02034B | 人蛋白質(zhì)二硫鍵異構酶(PDI)Elisa試劑盒 |
YS02035B | 人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶(CAD)Elisa試劑盒 |
YS02036B | 人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS)Elisa試劑盒 |
YS02037B | 人泛素激活酶(E1/UBAE)Elisa試劑盒 |
YS02038B | 人胃蛋白酶(PP)Elisa試劑盒 |
YS02039B | 人己糖激酶(HK)Elisa試劑盒 |
YS02040B | 人丙酮酸脫氫酶E1(PDHE1)Elisa試劑盒 |
YS02041B | 人糖原合成酶激酶(GSK)Elisa試劑盒 |
YS02042B | 人胱天蛋白酶9(Casp-9)Elisa試劑盒 |
YS02043B | 人胱天蛋白酶3(Casp-3)Elisa試劑盒 |
YS02044B | 人中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)Elisa試劑盒 |
YS02045B | 人碳酸酐酶2(CA-2)Elisa試劑盒 |
YS02046B | 人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)Elisa試劑盒 |
YS02047B | 人髓過氧化物酶(MPO)Elisa試劑盒 |
YS02048B | 人顆粒酶B(Gzms-B)Elisa試劑盒 |
YS02049B | 人顆粒酶A(Gzms-A)Elisa試劑盒 |
YS02050B | 人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)Elisa試劑盒 |
YS02051B | 人超氧化物歧化酶(SOD)Elisa試劑盒 |
YS02052B | 人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)Elisa試劑盒 |
YS02053B | 人組織蛋白去乙?;?HD)Elisa試劑盒 |
YS02054B | 人甲基化酶(Methylase)Elisa試劑盒 |
YS02055B | 人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)Elisa試劑盒 |
YS02056B | 人磷酸肌醇3激酶(PI3K)Elisa試劑盒 |
YS02057B | 人蛋白激酶B(PKB)Elisa試劑盒 |
YS02058B | 人血紅素氧合酶2(HO-2)Elisa試劑盒 |
YS02059B | 人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)Elisa試劑盒 |
YS02060B | 人甲狀腺過氧化物酶(TPO)Elisa試劑盒 |
YS02061B | 人αL巖藻糖苷酶(AFU)Elisa試劑盒 |
YS02062B | 人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)Elisa試劑盒 |
YS02063B | 人血紅素氧合酶1(HO-1)Elisa試劑盒 |
YS02064B | 人誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)Elisa試劑盒 |
YS02065B | 人磷脂酶A2(PL-A2)Elisa試劑盒 |
YS02066B | 人一氧化氮合成酶(NOS)Elisa試劑盒 |
YS02067B | 人端粒酶(TE)Elisa試劑盒 |
YS02068B | 人基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)Elisa試劑盒 |
YS02069B | 人基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)Elisa試劑盒 |
YS02070B | 人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)Elisa試劑盒 |
YS02071B | 人神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)Elisa試劑盒 |
YS02072B | 人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)Elisa試劑盒 |