詳細(xì)介紹
大鼠前列腺素E2(PGE2)Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記,。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性,。在測(cè)定時(shí),,受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開,。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例,。加入酶反應(yīng)的底物后,,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),,故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析,。
規(guī)格:48T 96T
檢 測(cè) 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測(cè)定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量,。
標(biāo) 本 要 求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
大鼠前列腺素E2(PGE2)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標(biāo)記抗體
①抗原: IgG
②酶標(biāo)抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,NaHCO3 1.46g,,水溶解,,定容500ml。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA,。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 ,。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,,Na2HPO4·12H2O 58g,NaCl 160g,, KCl 4g,,Tween-20 10mL 加水定容2L。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,,C6H8O7·H2O :1.05g,,用蒸餾水溶解,定容至1000mL,,調(diào)PH=3.6,。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,加60 mL 甲醇,,混勻,,加100mL 底物緩沖液,在暗處避光攪拌2小時(shí)至溶解,,4℃避光保存,。 ③H2O2 底物液:取140μL過氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應(yīng)用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,,TMB:H2O2=1:1混勻,。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
大鼠前列腺素E2(PGE2)Elisa試劑盒操作步驟
①抗原包被過夜(12h以上): IgG抗原,用包被液(CBS)稀釋,,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中,。4℃放置過夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,,37℃放置2h,。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測(cè)樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽(yáng)性對(duì)照,。37℃恒溫箱溫育2h。 測(cè)免疫效價(jià)待測(cè)樣品為小鼠血清時(shí):采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,,3000r 10min離心,。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開始),100μL /孔,。每個(gè)樣品平行做兩份,,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,已知樣品作為陽(yáng)性對(duì)照,。37℃恒溫箱溫育2h,。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次。
⑥加二抗(酶標(biāo)抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,,100μL/孔,, 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍(lán)色,。
⑨終止反應(yīng),、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃,;用酶標(biāo)儀測(cè)定450nm 630nm處各孔的吸光值,,陽(yáng)性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測(cè)樣品的效價(jià)。
大鼠前列腺素E2(PGE2)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
YS02016B | 人絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)Elisa試劑盒 |
YS02017B | 人溶菌酶(LZM)Elisa試劑盒 |
YS02018B | 人黏著斑激酶(FAK)Elisa試劑盒 |
YS02019B | 人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)Elisa試劑盒 |
YS02020B | 人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)Elisa試劑盒 |
YS02021B | 人精氨酸酶(Arg)Elisa試劑盒 |
YS02022B | 人中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(NAP)Elisa試劑盒 |
YS02023B | 人間變性淋巴瘤激酶(ALK)Elisa試劑盒 |
YS02024B | 人激動(dòng)異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB(CKMB)Elisa試劑盒 |
YS02025B | 人肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)Elisa試劑盒 |
YS02026B | 人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶pi基因(GSTpi)Elisa試劑盒 |
YS02027B | 人谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GST)Elisa試劑盒 |
YS02028B | 人泛素分解酶(DUB)Elisa試劑盒 |
YS02029B | 人分泌型磷脂酶A2(sPLA2)Elisa試劑盒 |
YS02030B | 人泛素連接酶(E3/UBPL)Elisa試劑盒 |
YS02031B | 人肥大細(xì)胞類胰蛋白酶(MCT)Elisa試劑盒 |
YS02032B | 人多巴色素異構(gòu)酶(DT)Elisa試劑盒 |
YS02033B | 人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)Elisa試劑盒 |
YS02034B | 人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)Elisa試劑盒 |
YS02035B | 人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶(CAD)Elisa試劑盒 |
YS02036B | 人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS)Elisa試劑盒 |
YS02037B | 人泛素激活酶(E1/UBAE)Elisa試劑盒 |
YS02038B | 人胃蛋白酶(PP)Elisa試劑盒 |
YS02039B | 人己糖激酶(HK)Elisa試劑盒 |
YS02040B | 人丙酮酸脫氫酶E1(PDHE1)Elisa試劑盒 |
YS02041B | 人糖原合成酶激酶(GSK)Elisa試劑盒 |
YS02042B | 人胱天蛋白酶9(Casp-9)Elisa試劑盒 |
YS02043B | 人胱天蛋白酶3(Casp-3)Elisa試劑盒 |
YS02044B | 人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)Elisa試劑盒 |
YS02045B | 人碳酸酐酶2(CA-2)Elisa試劑盒 |
YS02046B | 人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)Elisa試劑盒 |
YS02047B | 人髓過氧化物酶(MPO)Elisa試劑盒 |
YS02048B | 人顆粒酶B(Gzms-B)Elisa試劑盒 |
YS02049B | 人顆粒酶A(Gzms-A)Elisa試劑盒 |
YS02050B | 人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)Elisa試劑盒 |
YS02051B | 人超氧化物歧化酶(SOD)Elisa試劑盒 |
YS02052B | 人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)Elisa試劑盒 |
YS02053B | 人組織蛋白去乙?;?HD)Elisa試劑盒 |
YS02054B | 人甲基化酶(Methylase)Elisa試劑盒 |
YS02055B | 人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)Elisa試劑盒 |
YS02056B | 人磷酸肌醇3激酶(PI3K)Elisa試劑盒 |
YS02057B | 人蛋白激酶B(PKB)Elisa試劑盒 |
YS02058B | 人血紅素氧合酶2(HO-2)Elisa試劑盒 |
YS02059B | 人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)Elisa試劑盒 |
YS02060B | 人甲狀腺過氧化物酶(TPO)Elisa試劑盒 |
YS02061B | 人αL巖藻糖苷酶(AFU)Elisa試劑盒 |
YS02062B | 人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)Elisa試劑盒 |
YS02063B | 人血紅素氧合酶1(HO-1)Elisa試劑盒 |
YS02064B | 人誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)Elisa試劑盒 |
YS02065B | 人磷脂酶A2(PL-A2)Elisa試劑盒 |
YS02066B | 人一氧化氮合成酶(NOS)Elisa試劑盒 |
YS02067B | 人端粒酶(TE)Elisa試劑盒 |
YS02068B | 人基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)Elisa試劑盒 |
YS02069B | 人基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)Elisa試劑盒 |
YS02070B | 人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)Elisa試劑盒 |
YS02071B | 人神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)Elisa試劑盒 |
YS02072B | 人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)Elisa試劑盒 |