詳細介紹
大鼠凝血因子Ⅷ相關抗原Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,,又保留酶的活性。在測定時,,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應,。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,,也通過反應而結合在固相載體上,。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析,。
規(guī)格:48T 96T
檢 測 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測定山羊血清,、血漿及相關液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量,。
標 本 要 求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,,提取后應盡快進行實驗,。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,,但應避免反復凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠凝血因子Ⅷ相關抗原Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標記抗體
①抗原: IgG
②酶標抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,,NaHCO3 1.46g,,水溶解,定容500ml,。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA,。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,,Na2HPO4·12H2O 58g,,NaCl 160g, KCl 4g,,Tween-20 10mL 加水定容2L,。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,,用蒸餾水溶解,,定容至1000mL,調PH=3.6,。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,加60 mL 甲醇,,混勻,,加100mL 底物緩沖液,在暗處避光攪拌2小時至溶解,,4℃避光保存,。 ③H2O2 底物液:取140μL過氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,,TMB:H2O2=1:1混勻,。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
操作步驟
①抗原包被過夜(12h以上): IgG抗原,用包被液(CBS)稀釋,,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應板中,。4℃放置過夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,,37℃放置2h,。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測樣品為細胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,,空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽性對照,。37℃恒溫箱溫育2h,。 測免疫效價待測樣品為小鼠血清時:采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,3000r 10min離心,。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開始),,100μL /孔。每個樣品平行做兩份,,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照,,已知樣品作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h,。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次,。
⑥加二抗(酶標抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,,100μL/孔,, 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍色,。
⑨終止反應,、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標儀測定450nm 630nm處各孔的吸光值,,陽性反應的zui大稀釋度為待測樣品的效價,。
相關產(chǎn)品如下:
YS01262B 人細胞角蛋白18(CK-18)Elisa試劑盒
YS01263B 人嗜鉻蛋白A(CgA)Elisa試劑盒
YS01264B 人視網(wǎng)膜母細胞瘤抑制蛋白(pRB)Elisa試劑盒
YS01265B 人生長調節(jié)致癌基因α/黑素瘤因子(GROα)Elisa試劑盒
YS01266B 人成熟促進因子(MPF)Elisa試劑盒
YS01267B 人去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)Elisa試劑盒
YS01268B 人可溶性轉鐵蛋白受體(sTfR)Elisa試劑盒
YS01269B 人金屬硫蛋白(MT)Elisa試劑盒
YS01270B 人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3(AFP-L3)Elisa試劑盒
YS01271B 人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)Elisa試劑盒
YS01272B 人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體1(AFP-L1)Elisa試劑盒
YS01273B 人黑色素瘤標記物(MART)Elisa試劑盒
YS01274B 人高分子量細胞角蛋白(CK-HMW)Elisa試劑盒
YS01275B 人肝癌抗原(PHC)Elisa試劑盒
YS01276B 人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)Elisa試劑盒
YS01277B 人鼻咽癌(NPC)Elisa試劑盒
YS01278B 人膀胱癌抗原(UBC)Elisa試劑盒
YS01279B 人廣譜細胞角蛋白(P-CK)Elisa試劑盒
YS01280B 人膀胱腫瘤抗原(BTA)Elisa試劑盒
YS01281B 人中期因子(MK)Elisa試劑盒
YS01282B 人BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)Elisa試劑盒
YS01283B 人B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)Elisa試劑盒
YS01284B 人腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子(TSGF)Elisa試劑盒
YS01285B 人色素上皮衍生因子(PEDF)Elisa試劑盒
YS01286B 人克拉拉細胞蛋白(CC16)Elisa試劑盒
YS01287B 人低氧誘導因子1α(HIF-1α)Elisa試劑盒
YS01288B 人黑色素細胞抗體(MCAb)Elisa試劑盒
YS01289B 人轉鐵蛋白受體(TFR)Elisa試劑盒
YS01290B 人P53(P53)Elisa試劑盒
YS01291B 人細胞周期素D3(Cyclin-D3)Elisa試劑盒
YS01292B 人細胞周期素D2(Cyclin-D2)Elisa試劑盒
YS01293B 人細胞周期素D1(Cyclin-D1)Elisa試劑盒
YS01294B 人內皮抑素(ES)Elisa試劑盒
YS01295B 人鐵蛋白(FE)Elisa試劑盒
YS01296B 人微量轉鐵蛋白(MTF)Elisa試劑盒
YS01297B 人基質金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)Elisa試劑盒
YS01298B 人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)Elisa試劑盒
YS01301B 人組織多肽抗原(TPA)Elisa試劑盒
YS01302B 人鱗狀上皮細胞癌抗原2(SCCAg-2)Elisa試劑盒
YS01303B 人胰腺癌標志物CA242Elisa試劑盒
YS01304B 人胃腸癌標志物CA199Elisa試劑盒
YS01305B 人乳腺癌標志物-CA153Elisa試劑盒
YS01306B 人卵巢癌標志物CA125Elisa試劑盒
YS01307B 人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)Elisa試劑盒
YS01308B 人癌胚抗原(CEA)Elisa試劑盒
YS01309B 人基質金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)Elisa試劑盒
YS01310B 人基質金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)Elisa試劑盒
YS01311B 人基質金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)Elisa試劑盒
YS01312B 人抑瘤素M(OSM)Elisa試劑盒
YS01313B 人肺表面活性物質相關蛋白D(SP-D)Elisa試劑盒
YS01314B 人肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)Elisa試劑盒
YS01315B 人肺表面活性物質相關蛋白B(SP-B)Elisa試劑盒
YS01316B 人表面活性蛋白A(SP-A)Elisa試劑盒
YS01317B 人肺炎支原體抗體(MP-Ab)Elisa試劑盒
YS01318B 人肺炎衣原體抗體(Cpn-Ab)Elisa試劑盒
YS01319B 人肺耐藥蛋白(LRP)Elisa試劑盒
YS01320B 人α1抗胰糜蛋白酶(AACT)Elisa試劑盒
YS01321B 人肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)Elisa試劑盒
YS01322B 人幽門螺桿菌細胞毒素相關基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)Elisa試劑盒