詳細(xì)介紹
大鼠腎上腺素(EPI)Elisa試劑盒ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,,又保留酶的活性,。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng),。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi),。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上,。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例,。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),,故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
規(guī)格:48T 96T
檢 測(cè) 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測(cè)定山羊血清,、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量,。
標(biāo) 本 要 求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠腎上腺素(EPI)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標(biāo)記抗體
①抗原: IgG
②酶標(biāo)抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,,NaHCO3 1.46g,,水溶解,定容500ml,。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA,。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,,Na2HPO4·12H2O 58g,,NaCl 160g, KCl 4g,,Tween-20 10mL 加水定容2L,。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,,用蒸餾水溶解,,定容至1000mL,調(diào)PH=3.6,。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,,加60 mL 甲醇,混勻,加100mL 底物緩沖液,,在暗處避光攪拌2小時(shí)至溶解,,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL過(guò)氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻,。 ④底物應(yīng)用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,,TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
大鼠腎上腺素(EPI)Elisa試劑盒操作步驟
①抗原包被過(guò)夜(12h以上): IgG抗原,,用包被液(CBS)稀釋,,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過(guò)夜,。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,37℃放置2h,。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測(cè)樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,,空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽(yáng)性對(duì)照,。37℃恒溫箱溫育2h,。 測(cè)免疫效價(jià)待測(cè)樣品為小鼠血清時(shí):采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,3000r 10min離心,。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開(kāi)始),,100μL /孔。每個(gè)樣品平行做兩份,,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,,已知樣品作為陽(yáng)性對(duì)照。37℃恒溫箱溫育2h,。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次,。
⑥加二抗(酶標(biāo)抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,,100μL/孔,, 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍(lán)色,。
⑨終止反應(yīng),、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標(biāo)儀測(cè)定450nm 630nm處各孔的吸光值,,陽(yáng)性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測(cè)樣品的效價(jià),。
大鼠腎上腺素(EPI)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
人鼻咽癌細(xì)胞 CNE1
人鼻咽癌細(xì)胞 CNE2
人卵巢癌細(xì)胞 CoC1
人結(jié)腸癌細(xì)胞 COLO205
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 COLO320
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 COLO320 DM
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 COLO320 HSR
人結(jié)腸癌細(xì)胞 CW-2
人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞 DAMI
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 DLD-1
人前列腺癌細(xì)胞 DU145
人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞 EA.hy926
人食管癌細(xì)胞 Eca-109
人膀胱癌細(xì)胞 ECV-304
人膀胱癌細(xì)胞 EJ
人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞 ES-2
人腺癌細(xì)胞系 F56
人T淋巴瘤白血病細(xì)胞 H9/HTLV-IIIB
人永生化表皮細(xì)胞 hacat
人永生化表皮細(xì)胞 Hacat
人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞 HBL-100
人腦周細(xì)胞 HBVP
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 HCC827
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 HCC827
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 HCC-827
人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化) HCC-94
永生化人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 HCMEC/D3外來(lái)
人結(jié)腸癌細(xì)胞 HCT116
人結(jié)腸癌細(xì)胞 hct-15
人結(jié)腸癌細(xì)胞 hct-15
人結(jié)直腸癌癌細(xì)胞 HCT-8
人結(jié)直腸癌氟尿嘧啶耐藥株 HCT-8/FU
人結(jié)直腸癌紫杉醇耐藥株 HCT-8/Taxol
人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 HEC-1-A
人子宮膜腺癌細(xì)胞 HEC-1-B
人胚腎細(xì)胞 HEK-293(293)外來(lái)
人胚腎細(xì)胞 HEK-293A
人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞 HEL
人子宮頸癌細(xì)胞 HELA XB
人宮頸癌細(xì)胞 hela(chang liver)
人宮頸癌細(xì)胞 HeLa.S3
人宮頸癌細(xì)胞 HELA-S3
人子宮頸癌細(xì)胞 HELA外來(lái)
人肝癌細(xì)胞 Hep G2
人肝癌(HBV) Hep G2.2.15
人 SV40 轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞 HFOB1.19
人胃癌細(xì)胞 HGC-27
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞 HK-2
人腎上皮細(xì)胞 HKb20
人早幼粒白血病細(xì)胞 HL60
人微血管內(nèi)皮細(xì)胞株 HMEC-1
人骨肉瘤細(xì)胞 HOS
人胰腺癌細(xì)胞 HPAC
人肺動(dòng)脈平滑肌 HPASMC