大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16Elisa試劑盒ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記,。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,，又保留酶的活性,。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開,。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例,。加入酶反應(yīng)的底物后,，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析,。

規(guī)格：48T   96T

檢 測(cè) 范 圍 ：7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 ：本試劑盒用于測(cè)定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量,。

標(biāo) 本 要 求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16Elisa試劑盒試劑及試劑配制
 1. 抗原及酶標(biāo)記抗體 
①抗原： IgG 
②酶標(biāo)抗抗體：羊抗鼠IgG-HRP 
2.包被液（CBS）：Na2CO3   0.8g，NaHCO3  1.46g,，水溶解,，定容500ml。  
3. 封閉液（3％BSA+CBS 或5％牛奶+CBS）：含3％牛血清白蛋白（BSA）：10mL CBS中加入0.3g BSA,。含5％荷蘭牛奶：10mL CBS中加入0.5g牛奶 ,。 
4. 洗滌液（PBST 10*）：KH2PO4   4g，Na2HPO4·12H2O    58g,，NaCl   160g,， KCl  4g，Tween-20 10mL  加水定容2L,。  
5. 洗滌液(1*PBS)： PBST：H2O=1：9 
6. 底物溶液（4甲基酰苯氨） ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液)：稱NaAc·3H2O：1.13g,，C6H8O7·H2O ：1.05g，用蒸餾水溶解,，定容至1000mL,，調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液：稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜（DMSO）中,，加60 mL 甲醇,，混勻，加100mL 底物緩沖液,，在暗處避光攪拌2小時(shí)至溶解，4℃避光保存。 ③H2O2 底物液：取140μL過氧化氫（H2O2）加入200mL底物緩沖液混勻,。 ④底物應(yīng)用液：現(xiàn)用現(xiàn)配,，TMB:H2O2=1:1混勻。 
7. 終止液：2mol/L H2SO4 

大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16Elisa試劑盒操作步驟
 ①抗原包被過夜（12h以上）： IgG抗原,，用包被液（CBS）稀釋,，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過夜,。 抗原用量：0.1μg*100N/抗原濃度 （N為板數(shù)）
②封閉：棄上清 加300μL/孔封閉液,，37℃放置2h。 
③洗滌：用洗滌液洗3次 
④加一抗(待測(cè)樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清)：將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,，空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,，已知樣品血清（1：200稀釋于1%BSA+PBST中）作為陽性對(duì)照。37℃恒溫箱溫育2h,。 測(cè)免疫效價(jià)待測(cè)樣品為小鼠血清時(shí)：采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,，3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1：200開始),，100μL /孔,。每個(gè)樣品平行做兩份，小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,，已知樣品作為陽性對(duì)照,。37℃恒溫箱溫育2h。 
⑤洗滌：用洗滌液洗5次,。 
⑥加二抗（酶標(biāo)抗抗體）：羊抗鼠IgG-HRP,，用1%BSA+PBST l ：10000稀釋，100μL／孔,， 37℃恒溫箱溫育1h,。
⑦洗滌：用洗滌液洗5次， 
⑧顯色：加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,，37℃恒溫箱放置10min,，顯示藍(lán)色。 
⑨終止反應(yīng),、比色：加30μL/孔H2SO4終止液．顏色變黃,；用酶標(biāo)儀測(cè)定450nm  630nm處各孔的吸光值，陽性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測(cè)樣品的效價(jià),。

大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下：

人胚腎細(xì)胞    293T
          人卵巢癌細(xì)胞    3AO
人膀胱癌細(xì)胞    5637
人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系    5-8F
人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞    769-P
人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞    786-O 
人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞     95-D
人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞    A172
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞    A-204
人卵巢癌細(xì)胞    A2780
人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞    A3
人惡性黑色素瘤細(xì)胞    A375
人惡性黑色素瘤細(xì)胞    A375-EGFP
人皮膚黑色素瘤細(xì)胞    A375
人表皮癌細(xì)胞    A431(A-431)
人腎癌細(xì)胞    A498
 人肺癌細(xì)胞     A549
人橫紋肌瘤細(xì)胞    A673
人黑色素瘤細(xì)胞    A875
人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞    ACHN
人胃腺癌細(xì)胞    AGS
人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞    AN3 CA
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞    ARPE-19
人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞    AsPC-1 
人肝癌細(xì)胞    Bel-7402
人肝癌細(xì)胞氟尿嘧啶耐藥株    Bel7402/Fu
人肝癌細(xì)胞    Bel-7405
人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞    BT-474
人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞    BT-549
人膀胱癌細(xì)胞    BT-B
人膀胱癌細(xì)胞    BT-B
人原位胰腺腺癌細(xì)胞    BxPC-3
人宮頸癌細(xì)胞    C-33A
人結(jié)腸腺癌細(xì)胞    Caco-2
人肺癌細(xì)胞    Calu-1
人肺腺癌細(xì)胞    Calu-3
人退行性癌細(xì)胞    calu-6
人胰腺癌細(xì)胞    Capan-1
人胰腺癌細(xì)胞    Capan-2
人宮頸癌細(xì)胞    CaSKi
人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞    CCRF-CEM
人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞    CEM/C1
HeLa [Chang Liver]     Chang Liver