詳細(xì)介紹
產(chǎn)品相關(guān)參數(shù)
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
產(chǎn)品有效期:zui長6個(gè)月,,儲(chǔ)存條件2-8℃
產(chǎn)品特異性:人顆粒蛋白酶A抗體(PPAAb)Elisa試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng),。
產(chǎn)品實(shí)驗(yàn)設(shè)備:酶標(biāo)儀,, 37℃恒溫箱,,自動(dòng)洗板機(jī),,可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭,蒸餾水,,干凈的試管,,容量瓶等。
產(chǎn)品應(yīng)用領(lǐng)域:本ELISA試劑盒限科研,,嚴(yán)禁臨床使用
人顆粒蛋白酶A抗體(PPAAb)Elisa試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1.產(chǎn)品具有高效性,、靈敏性、特異性等特點(diǎn)
2.產(chǎn)品的穩(wěn)定性和可靠性,,檢測(cè)種屬有人,,動(dòng)物,植物,,金標(biāo)ELISA試劑盒等
3.產(chǎn)品吸附均勻,,吸附性能好,空白值低,,孔底透明度高
4.產(chǎn)品適用于 血清,、血漿、體液,、尿液等各種樣本
5.產(chǎn)品質(zhì)量保證,,由于產(chǎn)品本身質(zhì)量問題使實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想,可以換貨或退貨
6. 公司與順豐快遞密切合作,,保證了產(chǎn)品時(shí)效性與安全性
7.公司提供7*24小時(shí),,在實(shí)驗(yàn)過程中遇到的任何問題我司高級(jí)技術(shù)人員會(huì)為你提供技術(shù)指導(dǎo)
產(chǎn)品圖片
聲明
1. 限于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平,尚不能對(duì)所有原料進(jìn)行全面的鑒定分析,,本產(chǎn)品可能存
在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn),。
2. zui終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān),,請(qǐng)
務(wù)必準(zhǔn)備充足的待測(cè)樣品,。
3. 只有全部使用試劑盒內(nèi)的試劑才能保證檢測(cè)效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品,。只有嚴(yán)
格遵守本實(shí)驗(yàn)說明才會(huì)得到*的檢測(cè)結(jié)果,。
4. 有效期:6 個(gè)月。
【實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備】:
1. ELISA試劑盒及待測(cè)樣本
2. 酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片)
3. 高精度移液器,,EP管及一次性吸頭
4. 37℃恒溫箱,,雙蒸水或去離子水
5. 吸水紙
【標(biāo)本要求】:
1.血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。
2.血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心,。
3.尿液:
用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照此實(shí)行,。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。
5.培養(yǎng)細(xì)胞:
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。
6.組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,,稱取重量,。加入一定量的PBS,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),,或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),,其余冷凍備用,。
7.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
8.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
【人顆粒蛋白酶A抗體(PPAAb)Elisa試劑盒操作步驟】:
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,依次進(jìn)行稀釋數(shù)倍,。
加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同),、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
配液:將30倍(48T 的20 倍)濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,,拍干,。
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外,。
溫育:操作同3,。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
測(cè)定:以空白空調(diào)零,,450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
【計(jì)算結(jié)果】:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),,OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,;再乘以稀釋倍數(shù),;或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),,即為樣品的實(shí)際濃度。
【注意事項(xiàng)】:
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,。
6.底物請(qǐng)避光保存,。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
【洗板方法】:
1. 手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,,根據(jù)需要,,重復(fù)此過程數(shù)次。
2. 自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中,。
【人顆粒蛋白酶A抗體(PPAAb)Elisa試劑盒試劑盒特點(diǎn)體現(xiàn)】:
1、高效,、靈敏,、特異的抗體;
2,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,;
3、吸附性能好,,空白值低,,孔底透明度高的固相載體;
4,、適用血清,、血漿、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標(biāo)本類型;
5,、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi),。
elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,,回收率越高,,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,,而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,,就是說你的回收率是99%,這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系,,說明方法的準(zhǔn)確度,。比如水中總無機(jī)氯含量測(cè)定,樣品水中含有無機(jī)氯20mg/L,,取100mL被測(cè)水樣品,,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品,測(cè)定時(shí)忽略體積變化,如果測(cè)定出樣品中無機(jī)氯為2.98mg/L,,則認(rèn)為回收率為99%,。
【適用范圍】:
1.適用血清、血漿,、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型,;
2.可檢測(cè)動(dòng)物類型豐富:人,、猴、大鼠,、小鼠,、豚鼠、兔,、豬,、犬,、牛,、綿羊、雞,、蝦,、魚等
3.可檢測(cè)指標(biāo)齊全:白介素,干擾素,,血管緊張素,,肺炎衣原體,趨化因子,、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶,、炎癥因子、血管生成素 等等 指標(biāo)
【人顆粒蛋白酶A抗體(PPAAb)Elisa試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)】:
1.每個(gè)指標(biāo)需提供100微升樣品,,如做復(fù)孔則200微升
2.標(biāo)本離心處理后可通知我們工作人員上門取樣(僅限本市),,外省可通過泡沫箱加干冰或者冰袋寄送我司