詳細(xì)介紹
人環(huán)磷酸腺苷(cAMP)Elisa試劑盒吸附性能好,空白值低,,孔底透明度高的固相載體,,適用多種標(biāo)本類型并節(jié)約成本。其高效,、靈敏,、特異的抗體與高效,、靈敏、特異的抗體使實(shí)驗(yàn)曲線更*,。是一款可以讓您放心選購(gòu)的ELISA試劑盒產(chǎn)品,。
規(guī)格:48次,96次
檢 測(cè) 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,,3000
轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),,請(qǐng)按一次用量分裝,,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,,
在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
自備物品
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL,、20-200uL,、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
人環(huán)磷酸腺苷(cAMP)Elisa試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20 分鐘,。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,,這
屬于正常現(xiàn)象,,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用,。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存,。
3. 濃度為0 的S0 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白,;按照說(shuō)明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5
倍,zui終結(jié)果乘以5 才是樣本實(shí)際濃度,。
4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻,。
試劑的準(zhǔn)備
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20 稀釋,,即1 份的20×洗滌緩沖液加19 份的蒸餾水,。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,靜置1min 后甩盡孔內(nèi)液體,,在吸水紙上拍
干,如此洗板5 次,。
2. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,,浸泡1min,洗板5 次,。
人環(huán)磷酸腺苷(cAMP)Elisa試劑盒操作步驟
1. 從室溫平衡20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;
3. 樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL,;空白孔不加,。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗原100
μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,
如此重復(fù)洗板5 次(也可用洗板機(jī)洗板),。
6. 每孔加入底物A,、B 各50μL,37℃避光孵育15min,。
7. 每孔加入終止液50μL,,15min 內(nèi),在450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD 值,。
結(jié)果判斷
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel 工作表中,,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD 值作縱坐標(biāo),,繪制出
標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。
人環(huán)磷酸腺苷(cAMP)Elisa試劑盒性能
1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R 值,,大于等于0.9900,。
2. 靈敏度:zui低檢測(cè)濃度小于0.1 U/ml,。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于15%,。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存,。
6. 有效期:6 個(gè)月
免責(zé)聲明
1. 試劑盒僅供研究使用,,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,,由實(shí)驗(yàn)
者承擔(dān),,本公司概不負(fù)責(zé)。
2. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作,,實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書操作,,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
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