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詳細(xì)介紹
人6酮前列腺素(6-K-PG)Elisa試劑盒樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后,，3000
轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請(qǐng)按一次用量分裝,，凍存于-20℃,，避免反復(fù)凍融，
在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
自備物品
1. 酶標(biāo)儀（450nm）
2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL,、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
人6酮前列腺素(6-K-PG)Elisa試劑盒1. 試劑盒保存在2-8℃,，使用前室溫平衡20 分鐘,。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這
屬于正?，F(xiàn)象,，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,，密封（低溫干燥）保存,。
3. 濃度為0 的S0 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白；按照說明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5
倍,，zui終結(jié)果乘以5 才是樣本實(shí)際濃度,。
4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作,。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻,。
試劑的準(zhǔn)備
20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20 稀釋，即1 份的20×洗滌緩沖液加19 份的蒸餾水,。
洗板方法
1. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，靜置1min 后甩盡孔內(nèi)液體,，在吸水紙上拍
干,，如此洗板5 次。
2. 自動(dòng)洗板機(jī)：每孔注入洗液350μL,，浸泡1min,，洗板5 次。
人6酮前列腺素(6-K-PG)Elisa試劑盒操作步驟
1. 從室溫平衡20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,；
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加,。
4. 除空白孔外,，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗原100
μL，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，
如此重復(fù)洗板5 次（也可用洗板機(jī)洗板）,。
6. 每孔加入底物A、B 各50μL,，37℃避光孵育15min,。
7. 每孔加入終止液50μL，15min 內(nèi),，在450nm 波長處測定各孔的OD 值,。
結(jié)果判斷
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在Excel 工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),，對(duì)應(yīng)OD 值作縱坐標(biāo),，繪制出
標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值,。
人6酮前列腺素(6-K-PG)Elisa試劑盒性能
1. 準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R 值,，大于等于0.9900。
2. 靈敏度：zui低檢測濃度小于0.1 U/ml,。
3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng),。
4. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%,。
5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存,。
6. 有效期：6 個(gè)月
免責(zé)聲明
1. 試劑盒僅供研究使用,，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn)，否則所產(chǎn)生的一切后果,，由實(shí)驗(yàn)
者承擔(dān),，本公司概不負(fù)責(zé)。
2. 嚴(yán)格按照說明書操作,，實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,，后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
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