詳細(xì)介紹
人戊糖素(Pentosidine)Elisa試劑盒是一種敏感性高,,特異性強(qiáng),,重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。由于其試劑穩(wěn)定,、易保存,,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中,。
實(shí)驗(yàn)原理:
上海雅吉生物試劑盒檢測(cè)方法有:雙抗體夾心法、間接法,、競(jìng)爭(zhēng)法
標(biāo)本要求
1.血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。
2.血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心,。
3.尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。胸腹水,、腦脊液參照此實(shí)行。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),,用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。
5.培養(yǎng)細(xì)胞:
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右,。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。
6.組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),,或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用,。
7.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
8.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性,。
操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)喝寺檎畈《綢gM(MV-IgM)Elisa試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2000pg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1000pg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
500pg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
250pg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
125pg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同),、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,拍干,。
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外。
溫育:操作同3,。
洗滌:操作同5,。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色10分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
測(cè)定:以空白空調(diào)零,,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行,。
操作程序總結(jié):
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),,OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,;再乘以稀釋倍數(shù),;或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,,計(jì)算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度,。
人戊糖素(Pentosidine)Elisa試劑盒注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間很好控制在5分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣,。
請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,很好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),,請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用,。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:,;2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月
本說(shuō)明書(shū)48T同樣適用
上海雅吉生物ELISA試劑盒特點(diǎn)體現(xiàn):
一,、高效,、靈敏、特異---采用全進(jìn)口材料和抗體
二,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性---的科技水平
三,、吸附性能好,空白值低,,孔底透明度高的固相載體---嚴(yán)格的生產(chǎn)流程和規(guī)范操作
ELISA試劑盒適用范圍:
一.適用血清,、血漿,、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標(biāo)本類(lèi)型,;
二.可檢測(cè)動(dòng)物類(lèi)型豐富:人、猴,、大鼠,、小鼠、豚鼠,、兔,、豬、犬,、牛,、綿羊、雞,、蝦、魚(yú)等
三.可檢測(cè)指標(biāo)齊全:白介素,,干擾素,,血管緊張素,肺炎衣原體,,趨化因子,、生長(zhǎng)因子基質(zhì)金屬蛋白酶、炎癥因子,、血管生成素 等等 指標(biāo)
人戊糖素(Pentosidine)Elisa試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù):
1.每個(gè)指標(biāo)需提供100微升樣品,,如做復(fù)孔則200微升
2、標(biāo)本離心處理后請(qǐng)使用泡沫箱加冰袋郵寄至我司,;
2,、樣本在一周內(nèi)使用,保存條件2-8度,;
3,、代測(cè)服務(wù)只反饋實(shí)驗(yàn)結(jié)果原數(shù)據(jù)信息,不再提供相應(yīng)試劑盒,;
4,、需支付相應(yīng)試劑盒費(fèi)用,代測(cè)不產(chǎn)生任何費(fèi)用,;
上海雅吉生物科技有限公司坐落于上海松江科技技園區(qū),,現(xiàn)擁有來(lái)自人、小鼠,、大鼠,、兔,、豬等種屬的試劑盒5000余種,還可根據(jù)客戶(hù)要求定做試劑盒,,提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),。質(zhì)量好,使我們擁有*的客戶(hù),;價(jià)格低,,薄利多銷(xiāo)是我們生存的優(yōu)勢(shì)?;服務(wù)好,,讓我們?cè)跇I(yè)界擁有很好的口碑,。我們將一如既往堅(jiān)持質(zhì)量*,誠(chéng)信為本的理念,。?感謝新老客戶(hù)的博愛(ài)?。?/span>
人戊糖素(Pentosidine)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
犬肌酸激酶(CK)試劑盒 | 30-692.6U/L |
犬肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)試劑盒 | 3-83.4U/L |
犬乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒 | 1.0-46.5IU/L |
犬6-酮前列腺素F1α (6-K-PGF1α)試劑盒 | 11.25-312.7ng/L |
犬血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒 | 30-710.8 ng/L |
犬一氧化氮(NO)試劑盒 | 2.5-82.5μmol/L |
犬內(nèi)皮素(ET)ELISA試劑盒 | 2-58.7μg/L |
大鼠肌酸激酶(CK)試劑盒 | 20-493.4U/L |
大鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)試劑盒 | 15-392.3U/L |
大鼠乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒 | 1.0-42.6 IU/L |
大鼠超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒 | 10-269.2 U/mL |
大鼠丙二醛(MDA)試劑盒 | 0.75-32.9nmol/L |
大鼠谷胱甘肽(GSH)試劑盒 | 100-2122.4ng/L |
大鼠谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)試劑盒 | 100-2206.9U/L |
大鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1)試劑盒 | 30-741.6 ng/L |
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1)試劑盒 | 100-2340.6μg/L |
大鼠白介素1β(IL-1β)試劑盒 | 5-162.4 ng/L |
大鼠白介素6(IL-6)試劑盒 | 15-383.2pg/ml |
大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)試劑盒 | 45-1000.2ng/L |
大鼠幽門(mén)螺桿菌(HP) | 25-598ng/L |