人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽Elisa試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法（Sandwich ELISA）檢測樣品中靶蛋白的的濃度，其原理見圖2,。靶蛋白特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,，當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí)，其中的靶蛋白會(huì)與捕獲抗體結(jié)合,。當(dāng)加入生物素化的抗靶蛋白抗體后,，生物素化抗靶蛋白抗體與靶蛋白結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物

人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽Elisa試劑盒是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清,、血漿,、細(xì)胞或組織裂解液、或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-6的ELISA試劑盒,。
      人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽Elisa試劑盒檢測靈敏度高,，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好,。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明，zui小檢出量為4.75pg/ml,，與人IL-1,、IL-12、LIF,、LIFR,、OSM、CNTF,、G-CSF,、sgp130、IL-6 sR,、小鼠IL-6,、IL-11、IL-12和大鼠CNTF均沒有交叉反應(yīng),，板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于10%。
      IL-6即白細(xì)胞介素-6(簡稱白介6),，是一種多功能,、呈α螺旋、易于磷酸化和糖基化的細(xì)胞因子，分子量為22-28KD,。IL-6在免疫反應(yīng),、炎癥、血細(xì)胞生成,、骨代謝,、細(xì)胞增殖、生長,、存活和分化,、以及腫瘤等疾病的發(fā)生發(fā)展過程中有重要作用。 
      IL-6的受體是細(xì)胞表面的IL-6Rα和gp130亞基組成的異二聚體,。IL-6與IL-6Rα結(jié)合后引發(fā)IL-6Rα與gp130的二聚化,，從而激活下游的信號(hào)通路，主要包括JAK/STAT信號(hào)通路,、Ras信號(hào)通路以及PI3K信號(hào)通路,。IL-6Rα和gp130組成了IL-6的受體復(fù)合物，而gp130也是CLC,、CNTF,、CT-1、IL-11,、IL-27,、LIF、OSM等的受體復(fù)合物的組分

 

采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中靶蛋白的的濃度,，其原理見圖2,。靶蛋白特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí),，其中的靶蛋白會(huì)與捕獲抗體結(jié)合,。當(dāng)加入生物素化的抗靶蛋白抗體后，生物素化抗靶蛋白抗體與靶蛋白結(jié)合,，形成夾心的免疫復(fù)合物,。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin(HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,，因此鏈霉親和素連接的HRP就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲,。zui后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會(huì)催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),，在加入終止液后呈黃色,。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測。靶蛋白濃度與A450值呈正比,，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,，對照樣品吸光度值,，即可計(jì)算出樣品中靶蛋白濃度。

圖2. 雙抗體夾心ELISA原理圖,。

      一個(gè)包裝的本試劑盒,，包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測，可以進(jìn)行96次檢測,。
包裝清單：

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	包裝
PI330-1	人IL-6抗體預(yù)包被板	8孔×12條
PI330-2	樣品分析緩沖液	5ml
PI330-3	標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液	10ml
PI330-4	人IL-6標(biāo)準(zhǔn)品	2-4瓶
PI330-5	人IL-6生物素化抗體	10ml
PI330-6	辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin	10ml
PI330-7	洗滌液(20X)	30ml
PI330-8	TMB溶液	10ml
PI330-9	終止液	5ml
PI330-10	封板膜(透明)	2張
PI330-11	封板膜(白色)	2張
—	說明書	1份

保存條件：
      除標(biāo)準(zhǔn)品外,，4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,，1-2周內(nèi)有效,，-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。注意TMB溶液避光保存,。
注意事項(xiàng)：
      由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,，在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn)，所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn),。
      洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶，請室溫水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再配制工作液,。
      為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,，標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后，如果有剩余請勿再次使用,。
      TMB對人體有刺激性,，請注意適當(dāng)防護(hù)。
      如果發(fā)現(xiàn)TMB辣根過氧化物酶顯色液出現(xiàn)混濁或顏色變成藍(lán)色,，應(yīng)該停止使用,。
      加樣時(shí)，請注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差,。
      不宜混用不同批號(hào)的試劑盒組份,，每批次試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試。
      充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,，在加液后請輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板,，以保證混勻。
    很多操作在室溫進(jìn)行,，要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃,。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致zui終檢測到的吸光度顯著下降。
      洗滌過程非常重要,，洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大,。
      檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔,，以確保檢測結(jié)果的可信度。
      加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生,。
      本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品,，不得存放于普通住宅內(nèi),。
      為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。