詳細(xì)介紹
人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽Elisa試劑盒(Mitochondrial membrane potential assay kit with JC-1)是一種以JC-1為熒光探針,快速靈敏地檢測(cè)細(xì)胞,、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒,,可以用于早期的細(xì)胞凋亡檢測(cè)。
JC-1是一種廣泛用于檢測(cè)線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想熒光探針,??梢詸z測(cè)細(xì)胞,、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時(shí),,JC-1聚集在線粒體的基質(zhì)(matrix)中,,形成聚合物(J-aggregates),可以產(chǎn)生紅色熒光,;在線粒體膜電位較低時(shí),,JC-1不能聚集在線粒體的基質(zhì)中,此時(shí)JC-1為單體(monomer),,可以產(chǎn)生綠色熒光,。這樣就可以非常方便地通過(guò)熒光顏色的轉(zhuǎn)變來(lái)檢測(cè)線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對(duì)比例來(lái)衡量線粒體去極化的比例,。
線粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)標(biāo)志性事件,。通過(guò)JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測(cè)到細(xì)胞膜電位的下降,同時(shí)也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)檢測(cè)指標(biāo),。
JC-1單體的zui大激發(fā)波長(zhǎng)為514nm,,zui大發(fā)射波長(zhǎng)為529nm;JC-1聚合物(J-aggregates)的zui大激發(fā)波長(zhǎng)為585nm,,zui大發(fā)射波長(zhǎng)為590nm,。實(shí)際觀察時(shí),使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設(shè)置即可,。
人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽Elisa試劑盒提供了CCCP作為誘導(dǎo)線粒體膜電位下降的陽(yáng)性對(duì)照,。
對(duì)于六孔板中的樣品,本試劑盒共可以檢測(cè)100個(gè)樣品,;對(duì)于12孔中的樣品,,本試劑盒共可以檢測(cè)200個(gè)樣品。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品名稱(chēng) 包裝
C2006-1 JC-1(200X) 100μl/管,,共5管
C2006-2 超純水 90ml
C2006-3 JC-1染色緩沖液(5X) 80ml
C2006-4 CCCP(10mM) 20μl
— 說(shuō)明書(shū) 1份
保存條件:
-20℃保存。JC-1(200X)需避光保存,,并盡量避免反復(fù)凍融,。超純水和JC-1染色緩沖液(5X)也可4℃保存。
注意事項(xiàng):
JC-1(200X)在4℃,、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底,、管壁或管蓋內(nèi),可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用,。
必須先把JC-1(200X)用試劑盒提供的超純水充分溶解混勻后,,才可以加入JC-1染色緩沖液(5X)。不可先配制JC-1染色緩沖液(1X)再加入JC-1(200X),,這樣JC-1會(huì)很難充分溶解,,會(huì)嚴(yán)重影響后續(xù)的檢測(cè),。
裝載完JC-1后用JC-1染色緩沖液(1X)洗滌時(shí),使JC-1染色緩沖液(1X)保持4℃左右,,此時(shí)的洗滌效果較好,。
JC-1探針裝載完并洗滌后盡量在30分鐘內(nèi)完成后續(xù)檢測(cè)。在檢測(cè)前需冰浴保存,。
請(qǐng)勿把JC-1染色緩沖液(5X)全部配制成JC-1染色緩沖液(1X),,本試劑盒使用過(guò)程中需直接使用JC-1染色緩沖液(5X)。
如果發(fā)現(xiàn)JC-1染色緩沖液(5X)中有沉淀,,必須全部溶解后才能使用,,為促進(jìn)溶解可以在37℃加熱。
CCCP為線粒體電子傳遞鏈抑制劑,,對(duì)人體有害,,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用,,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,,不得存放于普通住宅內(nèi),。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作