人中性粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)Elisa試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法（Sandwich ELISA）檢測樣品中靶蛋白的的濃度，其原理見圖2,。靶蛋白特異的單克隆捕獲抗體已預包被于酶標板上,，當加入標準品或樣品時，其中的靶蛋白會與捕獲抗體結(jié)合,。當加入生物素化的抗靶蛋白抗體后,，生物素化抗靶蛋白抗體與靶蛋白結(jié)合，形成夾心的免疫復合物

人中性粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)Elisa試劑盒基本組成

完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：
（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）,；
（2）酶標記的抗原或抗體（結(jié)合物）,；
（3）酶的底物；
（4）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中）,，參考標準品和控制血清（定量測定中）,；
（5）結(jié)合物及樣本的稀釋液；
（6）洗滌液,；
（7）酶反應終止液,。

4.1  免疫吸附劑
已包被抗原或抗體的固相載體在低溫（2~8℃）干燥的條件下一般可保存6個月,。有些不完整的試盒,，僅供應包被用抗原或抗體,，檢測人員需自行包被。以下簡述固相載體和包被過程,。

4.1.1 固相載體
人中性粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)Elisa試劑盒固相載體在ELISA測定過程中作為吸附劑和容器,，不參與化學反應?？勺鱁LISA中載體的材料很多,，zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質(zhì)的性能,，抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后仍保留原來的免疫學活性,，加之它的價格低廉，所以被普遍采用,。聚苯乙烯為塑料,，可制成各種形式。
ELISA載體的形狀主要有三種：微量滴定板,、小珠和小試管,。以微量滴定板zui為常用，于EILSA的產(chǎn)品稱為ELISA板,，上標準的微量滴定板為8×12的96孔式,。為便于作少量標本的檢測，有制成8聯(lián)孔條或12聯(lián)孔條的,，放入座架后,，大小與標準ELISA板相同。ELISA板的特點是可以同時進行大量標本的檢測,，并可在特制的比色計上迅速讀出結(jié)果?，F(xiàn)在已有多種自動化儀器用于微量滴定板型的ELISA檢測，包括加樣,、洗滌,、保溫、比色等步驟,，對操作的標準化極為有利,。聚苯乙烯經(jīng)射線照射后，其吸附性能特別是對免疫球蛋白的吸附性能增加,，應用于雙抗體夾心法可使固相上抗體量增多,，但用于間接法測抗體時空白值較大。
良好的ELISA板應該是吸附性能好,，空白值低,，孔底透明度高,，各板之間、同一板各孔之間性能相近,。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別,，各種產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大，因此,，每一批號的ELISA板在使用前須事先檢查其性能,。
與聚苯乙烯類似的塑料是聚氯乙烯。作為ELISA固相載體,，聚氯乙烯的特點為質(zhì)軟板薄,，可剪割、價廉,，但光潔度不如聚苯乙烯板,，孔底亦不如聚苯乙烯平整。聚氯乙烯對蛋白質(zhì)的吸附性能比聚苯乙烯高,，但空白值也略高,。
為比較不同固相在某一ELISA測定中的優(yōu)劣，可應用如下的試驗：用其他免疫學測定方法選出一個典型的陽性標本和陰性標本,，將它們進行一系列稀釋后,，在不同的固相載體上按預定的ELISA操作步驟進行測定，然后比較結(jié)果,。在哪一種載體上陽性結(jié)果與陰性結(jié)果差別zui大這種載體就是這一ELISA測定項目的zui合適的固相載體,。
在ELISA中，用作固相載體的小珠一般為直徑0.6cm的圓珠,，表面經(jīng)磨砂處理后吸附面積大大增加,。ELISA板孔的吸附面積約為200mm2，小珠均為1000mm2,，將近ELISA板孔的5倍,。吸附面積的增大即意味著固相抗原或抗體量的增加。再者,，球型小珠的表面弧度更有利于吸附的抗原決定簇或抗體結(jié)合位點的暴露面處于*反應狀態(tài),，因此珠式ELISA的反應往往更為靈敏。小珠的另一特點是更易于使洗滌*,，使用特殊的洗滌器,，使小珠在洗滌過程中滾動淋洗，其洗滌效果遠較板孔的浸泡式為好,。但由于磨砂工藝的難度較大,，小珠的均一性較差。
小試管作為固相載體也有較大的吸附表面，而且標本的反應量也相應增加,。板式及珠式ELISA的標本量一般為100-200ul,，而小試管可根據(jù)需要加大反應體積，標本反應量的增加有助于試驗敏感性的提高,。小試管還可以當作比色杯,，zui后直接放入分光光度計中比色。
也有應用聚苯乙烯膠乳或其他材料制成的微粒作為ELISA固相載體的,。其優(yōu)點是表面積極大,，反應在懸液中進行,，其速率與液相反應近似,。以含鐵的磁性微粒作為ELISA固相載體，反應后用磁鐵的吸引進行分離,，洗滌方便,，一般均配以特殊儀器。