人橋粒芯糖蛋白-1（DSG-E1）Elisa試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法（Sandwich ELISA）檢測(cè)樣品中靶蛋白的的濃度,，其原理見圖2。靶蛋白特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,，當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí),，其中的靶蛋白會(huì)與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗靶蛋白抗體后,，生物素化抗靶蛋白抗體與靶蛋白結(jié)合,，形成夾心的免疫復(fù)合物

人橋粒芯糖蛋白-1(DSG-E1)Elisa試劑盒基本組成

完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：
（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；
（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）,；
（3）酶的底物,；
（4）陰性對(duì)照品和陽性對(duì)照品（定性測(cè)定中），參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測(cè)定中）,；
（5）結(jié)合物及樣本的稀釋液,；
（6）洗滌液；
（7）酶反應(yīng)終止液。

4.1  免疫吸附劑
已包被抗原或抗體的固相載體在低溫（2~8℃）干燥的條件下一般可保存6個(gè)月,。有些不完整的試盒,，僅供應(yīng)包被用抗原或抗體，檢測(cè)人員需自行包被,。以下簡(jiǎn)述固相載體和包被過程,。

4.1.1 固相載體
人橋粒芯糖蛋白-1(DSG-E1)Elisa試劑盒固相載體在ELISA測(cè)定過程中作為吸附劑和容器，不參與化學(xué)反應(yīng),?？勺鱁LISA中載體的材料很多，zui常用的是聚苯乙烯,。聚苯乙烯具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能,，抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后仍保留原來的免疫學(xué)活性，加之它的價(jià)格低廉,，所以被普遍采用。聚苯乙烯為塑料,，可制成各種形式,。
ELISA載體的形狀主要有三種：微量滴定板、小珠和小試管,。以微量滴定板zui為常用,，于EILSA的產(chǎn)品稱為ELISA板，上標(biāo)準(zhǔn)的微量滴定板為8×12的96孔式,。為便于作少量標(biāo)本的檢測(cè),，有制成8聯(lián)孔條或12聯(lián)孔條的，放入座架后,，大小與標(biāo)準(zhǔn)ELISA板相同,。ELISA板的特點(diǎn)是可以同時(shí)進(jìn)行大量標(biāo)本的檢測(cè)，并可在特制的比色計(jì)上迅速讀出結(jié)果?，F(xiàn)在已有多種自動(dòng)化儀器用于微量滴定板型的ELISA檢測(cè),，包括加樣、洗滌,、保溫,、比色等步驟，對(duì)操作的標(biāo)準(zhǔn)化極為有利,。聚苯乙烯經(jīng)射線照射后,，其吸附性能特別是對(duì)免疫球蛋白的吸附性能增加，應(yīng)用于雙抗體夾心法可使固相上抗體量增多,，但用于間接法測(cè)抗體時(shí)空白值較大,。
良好的ELISA板應(yīng)該是吸附性能好，空白值低,，孔底透明度高,，各板之間,、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別,，各種產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大,，因此，每一批號(hào)的ELISA板在使用前須事先檢查其性能,。
與聚苯乙烯類似的塑料是聚氯乙烯,。作為ELISA固相載體，聚氯乙烯的特點(diǎn)為質(zhì)軟板薄,，可剪割,、價(jià)廉，但光潔度不如聚苯乙烯板,，孔底亦不如聚苯乙烯平整,。聚氯乙烯對(duì)蛋白質(zhì)的吸附性能比聚苯乙烯高，但空白值也略高,。
為比較不同固相在某一ELISA測(cè)定中的優(yōu)劣,，可應(yīng)用如下的試驗(yàn)：用其他免疫學(xué)測(cè)定方法選出一個(gè)典型的陽性標(biāo)本和陰性標(biāo)本，將它們進(jìn)行一系列稀釋后,，在不同的固相載體上按預(yù)定的ELISA操作步驟進(jìn)行測(cè)定,，然后比較結(jié)果。在哪一種載體上陽性結(jié)果與陰性結(jié)果差別zui大這種載體就是這一ELISA測(cè)定項(xiàng)目的zui合適的固相載體,。
人橋粒芯糖蛋白-1(DSG-E1)Elisa試劑盒在ELISA中,，用作固相載體的小珠一般為直徑0.6cm的圓珠，表面經(jīng)磨砂處理后吸附面積大大增加,。ELISA板孔的吸附面積約為200mm2,，小珠均為1000mm2，將近ELISA板孔的5倍,。吸附面積的增大即意味著固相抗原或抗體量的增加,。再者，球型小珠的表面弧度更有利于吸附的抗原決定簇或抗體結(jié)合位點(diǎn)的暴露面處于*反應(yīng)狀態(tài),，因此珠式ELISA的反應(yīng)往往更為靈敏,。小珠的另一特點(diǎn)是更易于使洗滌*，使用特殊的洗滌器,，使小珠在洗滌過程中滾動(dòng)淋洗,，其洗滌效果遠(yuǎn)較板孔的浸泡式為好。但由于磨砂工藝的難度較大,，小珠的均一性較差,。
小試管作為固相載體也有較大的吸附表面，而且標(biāo)本的反應(yīng)量也相應(yīng)增加。板式及珠式ELISA的標(biāo)本量一般為100-200ul,，而小試管可根據(jù)需要加大反應(yīng)體積,，標(biāo)本反應(yīng)量的增加有助于試驗(yàn)敏感性的提高。小試管還可以當(dāng)作比色杯,，zui后直接放入分光光度計(jì)中比色,。
也有應(yīng)用聚苯乙烯膠乳或其他材料制成的微粒作為ELISA固相載體的。其優(yōu)點(diǎn)是表面積極大,，反應(yīng)在懸液中進(jìn)行,，其速率與液相反應(yīng)近似。以含鐵的磁性微粒作為ELISA固相載體,，反應(yīng)后用磁鐵的吸引進(jìn)行分離,，洗滌方便，人橋粒芯糖蛋白-1(DSG-E1)Elisa試劑盒一般均配以特殊儀器,。