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人堿性成纖維細(xì)胞生長因子Elisa試劑盒

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更新時(shí)間:2024-10-21 11:21:47瀏覽次數(shù):271

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨    
人堿性成纖維細(xì)胞生長因子Elisa試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測(cè)樣品中靶蛋白的的濃度,。靶蛋白特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí),,其中的靶蛋白會(huì)與捕獲抗體結(jié)合

詳細(xì)介紹

人堿性成纖維細(xì)胞生長因子Elisa試劑盒是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測(cè)小鼠血清,、血漿、細(xì)胞或組織裂解液,、或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-1β的ELISA試劑盒,。
      人堿性成纖維細(xì)胞生長因子Elisa試劑盒檢測(cè)靈敏度高,特異性強(qiáng),,重復(fù)性好,。多次重復(fù)檢測(cè)結(jié)果表明,zui小檢出量為2.6pg/ml,,與鼠IL-1α,、IL-1RA、IL-1 RI/Fc Chimera,、IL-1 RII/Fc Chimera,、人IL-1β等均沒有交叉反應(yīng),板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于10%,。
      IL-1即白細(xì)胞介素-1(簡稱白介1),其家族由IL-1α(也稱IL-1F1),、IL-1β(也稱IL-1F2),、IL-1受體拮抗劑(IL-1 receptor 
antagonist, 簡稱IL-1RA, 或IL-1F3)及IL-18、IL-33和IL-1F5~F10組成,。IL-1主要由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,,此外幾乎所有的有核細(xì)胞,如B細(xì)胞,、NK細(xì)胞,、體外培養(yǎng)的T細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞,、樹突狀細(xì)胞,、星形細(xì)胞、成纖維細(xì)胞,、中性粒細(xì)胞,、內(nèi)皮細(xì)胞以及平滑肌細(xì)胞均可產(chǎn)生IL-1。正常情況下只有皮膚,、汗液及尿液中含有一定量的IL-1,,絕大多數(shù)細(xì)胞在受到外來抗原或細(xì)菌內(nèi)毒素刺激后才能合成和分泌IL-1。IL-1β在免疫和炎癥反應(yīng),、骨重建(bone remodeling),、發(fā)燒,、碳水化合物代謝等生理、病理過程中都有重要作用,。血液中的IL-1主要是由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞所產(chǎn)生的IL-1β,。
      IL-1α和IL-1β在結(jié)構(gòu)上有一定的相似性并且在氨基酸水平有25%的同源性。兩者由不同的基因分別編碼產(chǎn)生約31kDa大小的前體蛋白,,并分別剪切成約17.5kDa大小的成熟蛋白,。IL-1α的前體蛋白有一定的生物活性,而IL-1β的前體蛋白幾乎沒有生物學(xué)功能,,所以其被Caspase-1/ICE剪切得到成熟的IL-1β是一個(gè)非常關(guān)鍵的步驟,。在大多數(shù)情況下,IL-1α和IL-1β以同樣的親和力結(jié)合于相同的細(xì)胞表面受體,,發(fā)揮相同的生物學(xué)作用,。IL-1有兩種跨膜受體蛋白,一種是分子量約為80kDa的IL-1 RI (IL-1 
receptor, type I),,其主要表達(dá)在T細(xì)胞,、成纖維細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞,、內(nèi)皮細(xì)胞,、滑膜細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及肝細(xì)胞中,;另一種是分子量約為68kDa的IL-1 RII (IL-1 receptor, type II),,其主要表達(dá)在B細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞及骨髓細(xì)胞中,。
      IL-1主要激活NF-κB信號(hào)通路調(diào)控炎癥因子的表達(dá),。IL-1和其受體結(jié)合后,激活下游一系列蛋白如JNK,、p38,、ERK1/2,及NF-κB和c-Jun
采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測(cè)樣品中靶蛋白的的濃度,。靶蛋白特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí),其中的靶蛋白會(huì)與捕獲抗體結(jié)合,。當(dāng)加入生物素化的抗靶蛋白抗體后,,生物素化抗靶蛋白抗體與靶蛋白結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物,。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin(HRP-Streptavidin),,由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲,。zui后加入顯色劑TMB溶液,,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會(huì)催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色,。通過酶標(biāo)儀檢測(cè)450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè),。靶蛋白濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,,對(duì)照樣品吸光度值,,即可計(jì)算出樣品中靶蛋白濃度。

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