人白介素23（IL-23）Elisa試劑盒應(yīng)用酶聯(lián)免疫競爭法測定標(biāo)本中指標(biāo)含量水平,。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中加：A,，和HRP 標(biāo)記的指標(biāo)抗原，使它們競爭結(jié)合,，,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。樣本顏色的深淺和樣品中的指標(biāo)含量呈負(fù)相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中的含量。

人白介素23(IL-23)Elisa試劑盒是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清,、血漿,、細(xì)胞或組織裂解液、或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-6的ELISA試劑盒,。
      人白介素23(IL-23)Elisa試劑盒檢測靈敏度高,，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好,。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,，zui小檢出量為4.75pg/ml，與人IL-1,、IL-12,、LIF、LIFR,、OSM,、CNTF、G-CSF,、sgp130,、IL-6 sR、小鼠IL-6,、IL-11,、IL-12和大鼠CNTF均沒有交叉反應(yīng)，板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于10%,。
      IL-6即白細(xì)胞介素-6(簡稱白介6)，是一種多功能,、呈α螺旋,、易于磷酸化和糖基化的細(xì)胞因子，分子量為22-28KD,。IL-6在免疫反應(yīng),、炎癥、血細(xì)胞生成,、骨代謝,、細(xì)胞增殖、生長,、存活和分化,、以及腫瘤等疾病的發(fā)生發(fā)展過程中有重要作用。 
      IL-6的受體是細(xì)胞表面的IL-6Rα和gp130亞基組成的異二聚體,。IL-6與IL-6Rα結(jié)合后引發(fā)IL-6Rα與gp130的二聚化,，從而激活下游的信號通路，主要包括JAK/STAT信號通路,、Ras信號通路以及PI3K信號通路,。IL-6Rα和gp130組成了IL-6的受體復(fù)合物，而gp130也是CLC,、CNTF,、CT-1、IL-11,、IL-27,、LIF、OSM等的受體復(fù)合物的組分
采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中靶蛋白的的濃度,。靶蛋白特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,，當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時，其中的靶蛋白會與捕獲抗體結(jié)合,。當(dāng)加入生物素化的抗靶蛋白抗體后,，生物素化抗靶蛋白抗體與靶蛋白結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物,。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin(HRP-Streptavidin),，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲,。zui后加入顯色劑TMB溶液,，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色,。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測,。靶蛋白濃度與A450值呈正比,，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對照樣品吸光度值,，即可計算出樣品中靶蛋白濃度,。

圖2. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

      一個包裝的本試劑盒,，包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,，可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單：
產(chǎn)品編號    產(chǎn)品名稱    包裝
PI330-1    人IL-6抗體預(yù)包被板    8孔×12條
PI330-2    樣品分析緩沖液    5ml
PI330-3    標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液    10ml
PI330-4    人IL-6標(biāo)準(zhǔn)品    2-4瓶
PI330-5    人IL-6生物素化抗體    10ml
PI330-6    辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin    10ml
PI330-7    洗滌液(20X)    30ml
PI330-8    TMB溶液    10ml
PI330-9    終止液    5ml
PI330-10    封板膜(透明)    2張
PI330-11    封板膜(白色)    2張
—    說明書    1份
保存條件：
      除標(biāo)準(zhǔn)品外,，4℃保存6個月內(nèi)有效,。標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存，1-2周內(nèi)有效,，-20℃保存6個月內(nèi)有效,。注意TMB溶液避光保存。
注意事項(xiàng)：
      由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,，在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),，所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
      洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,，請室溫水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再配制工作液。
      為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,，標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,，如果有剩余請勿再次使用。
      TMB對人體有刺激性,，請注意適當(dāng)防護(hù),。
      如果發(fā)現(xiàn)TMB辣根過氧化物酶顯色液出現(xiàn)混濁或顏色變成藍(lán)色，應(yīng)該停止使用,。
      加樣時,，請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染,，另一方面也避免吸取體積的誤差,。
      不宜混用不同批號的試劑盒組份，每批次試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試,。
      充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,，在加液后請輕輕晃動整個96孔板，以保證混勻,。
      本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,，要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致zui終檢測到的吸光度顯著下降。
      洗滌過程非常重要,，洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大,。
      檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測結(jié)果的可信度,。
      加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生,。
      人白介素23(IL-23)Elisa試劑盒僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療,，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi),。
      為了您的安全和健康,，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。