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MALDI蛋白樣品處理試劑盒

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更新時間:2024-10-21 09:40:52瀏覽次數(shù):358

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨    
MALDI蛋白樣品處理試劑盒產(chǎn)品及特點 本產(chǎn)品用于基質(zhì)輔助激光解吸離子化(Matrix Assisted LaserDesorption Ionization,,MALDI)分析,,所含的基質(zhì)液是 MALDI 分析的*的關(guān)鍵成分,其主要作用一是起到分子溶劑的作用

詳細介紹

MALDI蛋白樣品處理試劑盒產(chǎn)品及特點 本產(chǎn)品用于基質(zhì)輔助激光解吸離子化(Matrix Assisted LaserDesorption Ionization,,MALDI)分析,,所含的基質(zhì)液是 MALDI 分析的必
不可少的關(guān)鍵成分,其主要作用一是起到分子溶劑的作用,,使樣品分子分開,,
但又不會使蛋白質(zhì)發(fā)生共價修飾;而是能從激光脈沖中吸收能量,,使蛋白質(zhì)發(fā)生瞬間相變,,用于質(zhì)譜分析。

MALDI蛋白樣品處理試劑盒本產(chǎn)品的特點是:
1. 即開即用,,用戶不需要單獨準備各種成分,。
2. 經(jīng)過優(yōu)化,,可用于各種樣品的 MALDI 分析,。
3. 可以選擇 CCA(羥基苯丙烯酸),、DHB(2,5-二羥基苯甲酸)和 SA(芥
子酸)三種不同的基質(zhì)。CCA 適用于分子量在 5Kd 一下的蛋白質(zhì)和多
肽分析(肽指紋圖譜),;DHB 適合于一般蛋白質(zhì),、多肽、低聚糖,、脂和
合成多聚物的分析,;SA 適合分子量在 3Kd-150Kd 的蛋白質(zhì)分析。 規(guī)格及成分 成份
500 次包裝
(CAT#:111004-500)
MS 溶解液 50 mL
基質(zhì)液成份一 50 mg(干粉)
基質(zhì)液成份二 10 mL
使用手冊 1 份
運輸及保存 常溫運輸和保存,,有效期一年,。 自備試劑 MilliQ 水(可選)
使用方法 一:樣品準備
1、 將蛋白樣品真空凍干后加入 MS 溶解液 100 uL,,溶解半小時(期間
可以按下步配制基質(zhì)液),。蛋白質(zhì)的終濃度zui在 1-10 pmol/uL 之間。
如果是 Reverse-Phase-HPLC 制備的樣品,,則可以不加 MS 溶解液
而直接使用,。注意:一定要在蛋白質(zhì)樣品真空凍干前將其中的緩沖液、
鹽,、去污劑和變性劑等去除,,否則它們會嚴重影響蛋白質(zhì)晶體的形成,
沒有蛋白晶體的形成就不能進行 MALDI 分析,。
2,、 稱量 1 mg 左右的基質(zhì)干粉到一干凈的 EP 管中,按每 mg CCA 加 100
uL 基質(zhì)液成份二的比例加入基質(zhì)液成份二,,混勻后離心,。注意:此是用
于結(jié)晶用的飽和溶液,可能有沉淀,,故需要離心,。注意:基質(zhì)液
鮮配制。本試劑盒提供 50mg,,足夠配 50 次 200 uL 的基質(zhì)液,。
3、 選用下面兩種上樣法之一上樣,。也可以自選其他的上樣方法,。
二:Dried-Droplet 法上樣
1、 將 1 uL 蛋白質(zhì)樣品與 1 uL 新配的飽和基質(zhì)液混勻,。注意:可以多做幾
個不同的蛋白質(zhì)樣品和基質(zhì)液的比例,,在 1:1-10:1 均可。
2,、 用移液器將 1 uL 混合液點到 MS 儀器的樣品靶上,,讓液體在室溫下?lián)]發(fā)
干凈,。注意:不要有氣泡,槍頭也不要觸及靶面,,也不能攪動上樣后的
混合液,,在未結(jié)晶之前不要搖晃。樣品靶必須充分清洗干凈,,以免上次
試驗的殘留樣品的干擾,。
3、 如果樣品中含有非揮發(fā)性雜質(zhì),,在此步可以用自備的 MilliQ 水洗滌晶體
一次,。
4、 將樣品靶插入質(zhì)譜儀內(nèi),,后續(xù)操作按 MALDI-TOF 儀器使用手冊進行,。
5、 同樣方法處理自備對照樣品(一般儀器廠家提供),。
三:Thin-Layer 法上樣
1,、 用移液器將 1 uL 基質(zhì)液點到 MS 儀器的樣品靶上,在基質(zhì)液揮發(fā)前迅速
進入下一步操作,。
2,、 迅速用移液器將 1 uL 樣品點到 MS 儀器的樣品靶上,讓液體在室溫下?lián)]
發(fā)干凈,,一般需要 5 分鐘,。
3、 將樣品靶插入質(zhì)譜儀內(nèi),,后續(xù)操作按儀器使用手冊進行,。
4、 同樣方法處理自備對照樣品(一般儀器廠家提供),。
5,、 同樣方法處理標準品(儀器廠商提供)。

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