口蹄疫病毒O亞型RT-PCR檢測(cè)試劑盒口蹄疫（foot-and-mouth disease,，F(xiàn)MD）由口蹄疫病毒（FMDV）引起的多種偶蹄動(dòng)物高度接觸性傳染病,?？谔阋卟《緦儆谛『颂呛怂岵《究瓶谔阋卟?br />毒屬，病毒基因組為單股正鏈 RNA,，約含 8500 個(gè)核苷酸,。目前已知該病毒有 7個(gè)血清型，分別為 O,、A,、C、Asial,、SATl,、SAT2 和 SAT3，每種血清型包括多個(gè)亞型,，各型之間無(wú)交叉保護(hù),。我國(guó)及周邊國(guó)家流行 O 型、A 型和 Asial 型 3種血清的 FMDV,?？谔阋卟?duì)畜牧業(yè)生產(chǎn)危害性極大，是世界各國(guó)檢測(cè)和防疫的重點(diǎn)對(duì)象,。由于 FMDV 傳代速度快且有多種傳播途徑,，特別是康復(fù)和亞臨床感染動(dòng)物及其畜產(chǎn)品（主要為肉、奶類）帶毒,，給 FMD 的防疫工作帶來(lái)諸多困難,。目前檢測(cè) FMD 常用技術(shù)主要有動(dòng)物接種，病毒分離和血清學(xué)試驗(yàn)等,，這些方法有的費(fèi)時(shí)費(fèi)力,，有的存在非特異性反應(yīng)和敏感度低等缺點(diǎn)。針對(duì) O 型 FMDV 設(shè)計(jì)了特異性檢測(cè)引物,，建立了檢測(cè) FMDV 的RT-PCR 方法,，敏感度更高。

口蹄疫病毒O亞型RT-PCR檢測(cè)試劑盒具有下列特點(diǎn)：
1. 用于 O 型 FMDV 的定性鑒定檢測(cè)和分子流行病學(xué)調(diào)查,。
2. 能對(duì)樣品中 FMDV 進(jìn)行快速檢測(cè),，具有良好的特異性和敏感性。
3. 使用一管式 RT-PCR 試劑盒,，減少了操作步驟,，降低了操作誤差。
規(guī)格及成分 成分 編號(hào) 50 次塑料袋包裝
雙酶一管式 RT-PCR Buffer,，2× 91202A 750 μL
MMLV-Taq Mix 91202B 100 μL
O 型 FMDV 專一性引物對(duì) yw11651166 200 μL
O 型 FMDV 陽(yáng)性對(duì)照 ct11651166 50 μL
超純水 100935 1 mL
使用手冊(cè) 1 份
運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,，-20℃保存，保存期限一年。
自備試劑 一管式病毒 RANout 或柱式病毒 RNAout
使用方法 一,、樣品 RNA 的制備
用自選方法純化 O 型 FMDV 樣品的 RNA,，也可以另購(gòu)本公司的一管式病
毒 RANout 或柱式病毒 RNAout，上述兩款產(chǎn)品跟本試劑盒兼容,。
二,、陽(yáng)性對(duì)照
1. 為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)
照,，只提供沒(méi)有傳染性的,、可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 使用本陽(yáng)性對(duì)照時(shí),，由于其濃度較高,，一定要注意不要污染其他試劑和成分。
zui在專門的區(qū)域操作,。
三,、設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)（30 uL 體系）
3. 在 PCR 管中加入下列成分：
成 份 樣品 陽(yáng)性對(duì)照 陰性對(duì)照
雙酶一管式 RT-PCR Buffer，2× 15 uL 15 uL 15 uL
O 型 FMDV 專一性引物對(duì) 2 uL 2 uL 2 uL
樣品 RNA 1-5 uL 無(wú) 無(wú)
O 型 FMDV 陽(yáng)性對(duì)照 無(wú) 2 uL 無(wú)
補(bǔ)超純水到 28 uL 28 uL 28 uL
MMLV-Taq Mix 2 uL 2 uL 2 uL
4. 輕柔混勻后上機(jī),，按下面參數(shù)進(jìn)行 RT-PCR,。
過(guò)程 溫度 時(shí)間
逆轉(zhuǎn)錄 60℃ 30 分鐘
預(yù)變性 95℃ 5 分鐘
PCR 反應(yīng)
（30 個(gè)循環(huán)）
94℃ 30 s
61℃ 40 s
72℃ 1 分鐘
延伸 72℃ 10 分鐘
5. 電泳檢測(cè) RT-PCR 產(chǎn)物。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 402 bp,。
關(guān)聯(lián)產(chǎn)品 豬流行性腹瀉病毒 RT-PCR 檢測(cè)試劑盒（CAT#:11-4150）,、豬瘟病毒 RT-PCR
檢測(cè)試劑盒（CAT#:11-4230）