本產(chǎn)品是基因 miRNA 聚丙烯酰胺凝膠回收產(chǎn) miRNABACK (CAT#:70604)
的柱式升級產(chǎn)品,，可用于回收 200 nt 以下的小段 RNA,，尤其是 20 nt 左右的
microRNA(miRNA)分子,。

柱式miRNA PAGE膠回收試劑盒具有下列特點:
1. 可以回收 15-3000nt 范圍內(nèi)的各種長度的 RNA，包括 100nt 以下的 miRNA
段,。
2. 柱式回收法,，比沉淀法更見簡單快捷。
3. miRNA 回收率在 70%左右,。
4. 一站式,，即開即用，操作簡單,，用戶不需要自備任何試劑,。
5. 擴容性好，可小規(guī)模操作,，也可以大規(guī)模操作,。
規(guī)格及成分 成 份 編 號 50 次包裝
溶液 A 80203A 15 mL
溶液 B 80203B 15 mL
溶液 C 80203C 15 mL
溶液 D 80203D 40 mL
離心吸附柱 60911 50 套
通用洗柱液 60408 50 mL
RNA 洗脫液 71207 10 mL
使用手冊 80203sc 1 份
運輸及保存 常溫運輸,4℃保存(RNA 洗脫液 4℃保存)，有效期一年,。
自備試劑 PAGE 膠
柱式miRNA PAGE膠回收試劑盒使用方法 1. 切取含 miRNA 段的 PAGE 凝膠（100 mg 左右,，盡可能多地把多余的膠切
除，否則會影響回收效率）,，放入 1.5 mL 塑料離心管中,，用移液槍頭盡可能將
其搗碎（先在酒精燈上將槍頭的口燒密閉再用于搗碎），搗得越細越好,。
2. 加入 300 uL 溶液 A,。
3. 將離心管水平放置并室溫搖晃 3 小時以讓 miRNA 從 PAGE 凝膠中擴散出來。
如果回收的 RNA 段長度超過 100 nt,，搖晃時間應(yīng)適當(dāng)延長,。提高溫度到
45-65℃，RNA 擴散速度會增加,。
4. 12000-15000 g 室溫離心 1-2 分鐘,，將含 RNA 的上清液轉(zhuǎn)移到一個新的 5mL
的塑料離心管中。
5. 加入 300 uL 溶液 B,、300 uL 溶液 C 和 750 uL 溶液 D 混合均勻?qū)㈦x心管中
的溶液分兩次轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,，每次轉(zhuǎn)移后都先靜置 3 分鐘，然后再
12000-15000 g 離心 1 分鐘,，倒掉收集管中的液體,。
6. 加入 700 uL 通用洗柱液于離心吸附柱中。12000-15000 g 離心 1 分鐘,，倒
棄收集管中的廢液,。
7. 12000-15000 g 離心半分鐘以去除離心吸附柱中的殘留液體。
8. 將離心吸附柱置于一新的干凈的離心管（自備）中，加入 25-50 uL RNA 洗脫
液,，靜置 3 分鐘,。
9. 12000-15000 g 離心 1 分鐘，離心管底部所得溶液即為純化的 miRNA 溶液,，
可立即用于后續(xù)實驗或者放冰箱長期保存,。
10. 可以 PAGE 電泳檢查回收效率，zui使用基因的高靈敏的超快核酸銀染試
劑（CAT#:81104）染色以節(jié)約 miRNA 樣品的用量,。
背景資料 DNA-Silica

結(jié)合原理及影響因素（綜述,見 2006-2007 目錄或）
關(guān)聯(lián)產(chǎn)品 超快核酸銀染試劑（CAT#:81104）