化學(xué)發(fā)光法激酶活性檢測試劑盒（Kinase-Lumi™ Luminescent Kinase Assay Kit），是一種通過化學(xué)發(fā)光法測定激酶反應(yīng)后溶液中ATP的剩余量（Z高可達(dá)10μM）來定量檢測激酶活性的試劑盒,。本試劑盒也可用于檢測任何消耗ATP的酶,，例如ATPase。

 Kinase-Lumi™化學(xué)發(fā)光法激酶活性檢測試劑盒(Kinase-Lumi™ Luminescent Kinase Assay Kit),，是一種通過化學(xué)發(fā)光法測定激酶反應(yīng)后溶液中ATP的剩余量(zui高可達(dá)10μM)來定量檢測激酶活性的試劑盒,。本試劑盒也可用于檢測任何消耗ATP的酶，例如ATPase,。
      本試劑盒可以檢測反應(yīng)體系中濃度zui高為10μM的ATP,，并在0-10μM范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。對于更高濃度的ATP,，可以選購檢測濃度上限為50μM的Kinase-Lumi™增強(qiáng)型化學(xué)發(fā)光法激酶活性檢測試劑盒(Kinase-Lumi™ Plus Luminescent Kinase
Assay Kit)或上限為200μM的Kinase-Lumi™*型(Kinase-Lumi™ Max Luminescent Kinase
Assay Kit),，或者需要適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行檢測。另外兩個(gè)試劑盒分別在0-50μM和0-200μM范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系,。
      本試劑盒應(yīng)用范圍廣,，適用于各類消耗ATP的激酶，包括以蛋白或多肽為底物的蛋白激酶和以糖,、脂,、醇等為底物的非蛋白激酶。本試劑盒也同樣適用于檢測消耗ATP的ATPase,。
      本試劑盒的檢測激酶活性的原理參考圖1,。激酶在反應(yīng)過程中催化ATP上的磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到底物的羥基上，從而使ATP轉(zhuǎn)變?yōu)锳DP,，這樣就可以根據(jù)ATP的減少量來定量激酶的活性,。借助ATP依賴的螢光素酶(也稱熒光素酶)催化的螢光素發(fā)光反應(yīng)，ATP可以通過測定化學(xué)發(fā)光來進(jìn)行定量,。這樣就可以通過設(shè)置ATP的標(biāo)準(zhǔn)曲線,，來定量激酶反應(yīng)體系中的ATP剩余量，從而計(jì)算出ATP的消耗量,，zui終計(jì)算出激酶的活性,。激酶的活性和ATP的剩余量成反比，即激酶活性越高，ATP剩余量越少,，發(fā)光值越低,；反之，激酶活性越低,，ATP剩余量越多,，發(fā)光值越高。

圖1. 本試劑盒檢測激酶活性的原理圖,。
      本試劑盒的使用非常便捷,，對于待測樣品僅需加入等體積的檢測試劑即可完成檢測反應(yīng),，并且檢測反應(yīng)可以僅在一個(gè)孔內(nèi)完成,。本試劑盒不僅適合少量樣品的檢測，也非常適合大量樣品的高通量篩選(high-throughput screening)檢測,。
      本試劑盒不僅操作特別方便,，并且由于使用了熱穩(wěn)定的螢火蟲螢光素酶并對反應(yīng)體系進(jìn)行了優(yōu)化，檢測體系的發(fā)光信號也非常穩(wěn)定,。加入檢測試劑后10分鐘即可產(chǎn)生非常穩(wěn)定的化學(xué)發(fā)光,，30分鐘內(nèi)化學(xué)發(fā)光的下降通常不會超過10%。
      對于96孔板,，我們推薦使用50μl激酶反應(yīng)體系和50μl的檢測試劑,，總體積為100μl，此時(shí)本試劑盒可以進(jìn)行200或2000次檢測,。對于384孔板,，我們推薦使用10μl激酶反應(yīng)體系和10μl的檢測試劑，總體積為20μl,，此時(shí)本試劑盒可以進(jìn)行1000或10000次檢測,。也可以用其它體積，但激酶反應(yīng)體積和檢測試劑體積的比例必須為1:1,。
包裝清單：
產(chǎn)品編號    產(chǎn)品名稱    包裝
S0150S-1    Kinase-Lumi™化學(xué)發(fā)光法激酶活性檢測試劑    10ml
S0150S-2    0.5mM ATP    0.2ml
—    說明書    1份
保存條件：
      -20℃保存,，半年有效。-80℃保存,，一年有效,。檢測試劑需避光保存。
注意事項(xiàng)：
      本試劑盒的檢測試劑中含有螢光素酶,，反復(fù)凍融會導(dǎo)致其逐漸失活,。為取得較好的使用效果，*次解凍后可適當(dāng)分裝,，且分裝后的檢測試劑凍融次數(shù)不宜超過3次,。反復(fù)凍融過程中，可能會導(dǎo)致檢測試劑中出現(xiàn)少量沉淀,，此時(shí)宜平衡至室溫,，并盡量溶解,。如仍有殘留的不溶物，可以離心去除后使用,，經(jīng)測試不會影響后續(xù)的檢測效果,。
      建議激酶或ATPase的反應(yīng)盡量在室溫(約25℃)進(jìn)行，如果不是在室溫進(jìn)行,，需把樣品平衡至室溫才能用本試劑盒檢測,。
      中提供的ATP僅足夠用于標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢測，用于激酶反應(yīng)的ATP需自備,。
      檢測時(shí)需使用白色或黑色的96孔板或384孔板,。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相鄰孔之間會產(chǎn)生相互干擾,。
      本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品,，不得存放于普通住宅內(nèi),。
      為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。