詳細(xì)介紹
抗氟離子酸性磷酸酶檢測(cè)試劑盒(Fluoride Resistant Acid Phosphatase Assay Kit)是一種用于快速,、便捷地檢測(cè)細(xì)胞或組織樣品的裂解或勻漿產(chǎn)物的上清液,、血漿、血清,、尿液等樣品中內(nèi)源性的抗氟離子酸性磷酸酯酶活性的試劑盒,。
酸性磷酸酶(Acid Phosphatase),也稱酸性磷酸酯酶,,在酸性條件下可以催化磷酸酯鍵的水解,。酸性磷酸酶是一個(gè)蛋白家
族,哺乳動(dòng)物中其分子量從18kD到100kD不等,。酸性磷酸酶主要分為兩類,,一類為抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase, TRAP),一類為抗氟離子酸性磷酸酶(fluoride resistant acid phosphatase, FRAP),。
抗氟離子酸性磷酸酶包括在絕大多數(shù)細(xì)胞的溶酶體中表達(dá)的溶酶體酸性磷酸酶,、前列腺(prostate gland)、腦,、肝臟、脾臟和血小板中表達(dá)的酸性磷酸酶,??狗x子酸性磷酸酶在前列腺中的表達(dá)水平非常高,,當(dāng)前列腺發(fā)生癌變并出現(xiàn)轉(zhuǎn)移時(shí)抗氟離子的前列腺特異性酸性磷酸酶(prostatic acid phosphatase)活性水平zui高。當(dāng)前列腺發(fā)生病變時(shí)會(huì)導(dǎo)致血液中抗氟離子酸性磷酸酶活性顯著升高,。同時(shí),,血液中檢測(cè)到抗氟離子酸性磷酸酶活性升高時(shí),通常是前列腺發(fā)生病變,。因此,,血清或血漿中抗氟離子酸性磷酸酶活性水平的升高,常被用作前列腺癌等前列腺病變的指標(biāo),。溶酶體儲(chǔ)存性疾病(lysosomal storage diseases)如Gaucher's
disease等,,也會(huì)導(dǎo)致血液中抗氟離子酸性磷酸酶活性水平一定程度的升高。
抗氟離子酸性磷酸酶檢測(cè)試劑盒可以檢測(cè)血漿,、血清,、尿液、細(xì)胞或組織的裂解液或勻漿液或純化的酶樣品等中的抗氟離子酸性磷酸酶活性,。
Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)是一種常用的磷酸酶顯色底物,,在酸性條件下,可在酸性磷酸酶作用下生成
para-nitrophenol,。para-nitrophenol (p-nitrophenol)在堿性條件下,,呈黃色產(chǎn)物,可以在400-415nm檢測(cè)吸光度,。產(chǎn)物黃色越深,,說明酸性磷酸酶檢活性越高,反之則酶活性越低,。據(jù)此通過比色分析就可以計(jì)算出酸性磷酸酶活性水平,。在適量的氟離子存在的情況下進(jìn)行酸性磷酸酶的活性檢測(cè),檢測(cè)得到的酸性磷酸酶活性就是抗氟離子酸性磷酸酶活性,。
包括標(biāo)準(zhǔn)品和空白對(duì)照,,本試劑盒共可進(jìn)行120個(gè)樣品的檢測(cè)。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝
P0335-1 檢測(cè)緩沖液 15ml
P0335-2 顯色底物 2管
P0335-3 氟離子溶液 1ml
P0335-4 p-nitrophenol溶液(10mM) 0.1ml
P0335-5 反應(yīng)終止液 20ml
— 說明書 1份
保存條件:
-20℃保存,,一年有效,。顯色底物和p-nitrophenol溶液需避光保存。
注意事項(xiàng):
如果希望進(jìn)行酶活性的定量,,進(jìn)行酶反應(yīng)時(shí)必須注意精確計(jì)時(shí),。此時(shí)推薦采用孵育30分鐘等較長的時(shí)間,以減小操作過程中的時(shí)間誤差,。同時(shí)如果樣品中酶活性較高,,則可以預(yù)先適當(dāng)稀釋樣品。
樣品溶液中須避免出現(xiàn)各種酸性磷酸酶抑制劑。
一管顯色底物配制后需當(dāng)日使用完畢,,因此請(qǐng)注意適當(dāng)多準(zhǔn)備一些樣品一起檢測(cè),,以避免試劑盒浪費(fèi)。
氟離子溶液和p-nitrophenol溶液對(duì)人體有害,,操作時(shí)請(qǐng)小心,,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。反應(yīng)終止液有腐蝕性,,操作時(shí)請(qǐng)小心,,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或腐蝕其他物品。
僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,,不得用于臨床診斷或治療,,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi),。
為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。