詳細(xì)介紹
總谷胱甘肽過氧化物酶檢測試劑盒(GSH and GSSG Assay Kit)是一種簡單易行的可以分別檢測出GSH(還原型谷胱甘肽)和GSSG(氧化型谷胱甘肽)含量的檢測試劑盒,。
通過谷胱甘肽還原酶把GSSG還原成GSH,而GSH可以和生色底物DTNB反應(yīng)產(chǎn)生黃色的TNB和GSSG,。適當(dāng)配制反應(yīng)體系,,前后兩個反應(yīng)合并起來后,總谷胱甘肽(GSSG+GSH)就相當(dāng)于一個顏色產(chǎn)生的限速因素,,總谷胱甘肽的量就決定了黃色的TNB形成量,。從而通過測定A412就可以計算出總谷胱甘肽的量,。用適當(dāng)試劑先清除樣品中的GSH,然后利用上述反應(yīng)原理就可以測定出GSSG的含量,。用總谷胱甘肽(GSSG+GSH)的量扣除GSSG的含量,,就可以計算出GSH的含量。
總谷胱甘肽過氧化物酶檢測試劑盒的具體反應(yīng)原理如下:
兩個反應(yīng)相合并:
還原型谷胱甘肽是絕大多數(shù)活細(xì)胞中巰基的主要來源,,對于維護(hù)蛋白巰基適當(dāng)?shù)难趸€原狀態(tài)有重要作用,,并且是動物細(xì)胞中關(guān)鍵的抗氧化劑??偣入赘孰闹型ǔ?0-95%為還原型谷胱甘肽,。
本試劑盒可以檢測動物組織、血漿,、紅細(xì)胞,、和培養(yǎng)細(xì)胞或其它適當(dāng)樣品中GSH和GSSG的含量。
本試劑盒提供了蛋白去除試劑M,,可以更加準(zhǔn)確地測定出含有蛋白的樣品中的GSH和GSSG的量,。
的檢測下限為0.5μM。一個試劑盒共可以進(jìn)行100次檢測,,可以測定100個樣品的總谷胱甘肽或GSSG的含量,,或可以測定出50個樣品中GSH和GSSG的各自含量。
包裝清單:
產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝
S0053-1 總谷胱甘肽檢測緩沖液 60ml
S0053-2 谷胱甘肽還原酶 150μl
S0053-3 氧化型谷胱甘肽 (GSSG) 5mg
S0053-4 DTNB 4.5mg
S0053-5 蛋白去除試劑M 1g
S0053-6 NADPH 4mg
S0053-7 DMSO 1.5ml
S0053-8 GSH清除輔助液 0.8ml
S0053-9 GSH清除試劑 160μl
— 說明書 1份
保存條件:
-20℃保存,,一年有效,。GSSG配制成溶液后,需適當(dāng)分裝,,-20℃保存至少3個月有效,。DTNB溶解于DMSO后,需適當(dāng)分裝,,-20℃保存至少3個月有效,。蛋白去除試劑M配制成溶液后僅限當(dāng)天使用。NADPH溶解后,,適當(dāng)分裝,,-70℃保存。稀釋的GSH清除輔助液和GSH清除試劑溶液均須新鮮配制使用,。
注意事項:
本試劑盒檢測時牽涉到氧化還原反應(yīng),,所有氧化劑或還原劑都會干擾本試劑盒的測定。特別是DTT,、巰基乙醇等含有巰基的試劑會嚴(yán)重干擾本試劑盒的測定,,請盡量避免。
一定要嚴(yán)格控制反應(yīng)時的溫度和反應(yīng)時間,否則每次都需做標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
NADPH等試劑不太穩(wěn)定,,要嚴(yán)格按照后續(xù)說明操作,謹(jǐn)防失活,。
蛋白去除試劑M溶液必須新鮮配制并限當(dāng)日使用,。GSH清除試劑也須新鮮稀釋后使用。
蛋白去除試劑M較難溶解,,可以通過劇烈vortex并適當(dāng)加熱(不超過37℃)以促進(jìn)溶解,。
DMSO在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固,,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用,。
僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,,不得用于食品或藥品,,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。