詳細介紹
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,,不得用于人體臨床直接檢測,。避免給您帶來不必要的損失,,請仔細閱讀購買說明,!
產(chǎn)品名稱:乙醛脫氫酶(ALDH)紫外分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測試方法: 紫外分光光度法
貨號:GOY-01S6349
分類:輔酶Ⅰ系列
商品介紹:
乙醛脫氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種,,廣泛存在于各種動物,、植物和微生物體內(nèi)。主要作用是將乙醛氧化成乙酸,,在酒精代謝中起主要作用,。在人類和許多動物體內(nèi),線粒體乙醛脫氫酶能把對生物體有害的醇類轉(zhuǎn)化,,所以在細胞解毒研究中乙醛脫氫酶受到高度關(guān)注,;同時,乙醛脫氫酶在分子生物學(xué)以及相關(guān)疾病的檢測方面有較廣泛的研究應(yīng)用,。
測定原理
在輔酶Ⅰ存在的條件下,,乙醛脫氫酶催化乙醛和NAD+轉(zhuǎn)化為乙酸和NADH,在340nm處的吸光值會增加,,測定340nm處的吸光值變化,,可計算得到乙醛脫氫酶的活性。
自備實驗用品及儀器
天平,、離心機,、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計,、1mL石英比色皿,、蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,,4℃保存,。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存,。
試劑一:粉劑×1瓶,,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存,;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存,;
試劑四:液體50mL×1瓶,, 4℃保存;
測定步驟
1,、 分光光度計預(yù)熱30min以上,,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零,。
2,、 將試劑一、二,、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘,。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,,200W,,破碎3s,間歇7s,,總時間1min),,然后4℃,8000g離心10min,,取上清測定,。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),,冰浴勻漿后于4℃,,200g離心5min,棄沉淀,,取上清在4℃,,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,,取沉淀加1mL提取液二,,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,,破碎3s,,間歇7s,總時間1min),,然后4℃,,8000g離心10min,,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,,按照步驟①提取粗酶液,,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液,。
CREB調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體 鋅指蛋白ZBTB6抗體
軟骨相關(guān)蛋白CRTAP抗體 鋅指蛋白ZBTB5抗體
1號染色體開放閱讀框100抗體 鋅指蛋白ZBTB3抗體
1號染色體開放閱讀框104抗體 鋅指蛋白ZBTB38抗體
1號染色體開放閱讀框112抗體 鋅指蛋白ZBTB34抗體
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大鼠金屬轉(zhuǎn)運蛋白1(MTP1)elisa分析檢測試劑盒
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乙醛脫氫酶(ALDH)紫外分光光度法測試盒柱式凝固血液 DNAout50 次 一站式 GST 標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝20 次
FTA 血片 DNAout50 次 一站式 GST 標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝20 次
柱式凍存血液 DNAout50 次 一站式 DNA 尿素 -PAGE 電泳套裝30 次
柱式凍存血液 DNAout250 次 一站式 DNA 非變性 PAGE 電泳套裝30 次
血液線粒體和核 DNA 雙提試劑盒 25 次 一站式 CTAB-PAGE 電泳套裝30 次
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位,。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,,1×10-3 L,;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm,;d:比色皿光徑,,1cm;V樣:加入樣本體積,,0.1 mL,;V樣總:加入提取液體積,1mL,;T:反應(yīng)時間,,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,g,。